长期低剂量摄入氯化镧对大鼠神经系统的影响与机制探讨

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1、中国医科大学研究生学位论文独创性声明本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得我校或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料，与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。论文作者签名：j塑j日期：中国医科大学研究生学位论文版权使用授权书本人完全了解中国医科大学有关保护知识产权的规定，

2、即：研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属中国医科大学。本人保证毕业离校后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位为中国医科大学，且导师为通讯作者，通讯作者单位亦署名为中国医科大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。学校可以公布学位论文的全部或部分内容(保密内容除外)，以采用影印、缩印或其他手段保存论文。论文作者签名：·』i塑5指导教师签名：—鼋牡长期低剂量摄人氯化镧对大鼠神经系统的影响及机制探讨目的在我国，随着稀土应用的日益广泛，特别是稀土微肥、微饲被用

3、于农业、畜牧业生产以来，越来越多的稀土进入环境、进入食物链。因此，稀土对环境和人体健康的影响引起了人们的密切关注。大量研究表明稀土没有明显的致癌、致畸和致突变作用，低剂量的稀土还能够增强免疫系统的防御能力和提高体内的抗氧化能力。但朱为方等对赣南离子吸附型稀土矿区人群的流行病学调查显示长期摄入稀土能够损害脑的功能。体外实验和急性中毒实验证明稀土抑制神经递质的释放并影响突触传递。但目前有关稀土对实验动物脑的亚慢性毒性的研究还未见报道。本工作在饮水中加入轻稀土元素镧，研究不同剂量的镧对成年大鼠脑内微量元素含量及

4、中枢神经系统功能、脑内生化指标的影响，对大鼠生理和神经发育的影响，为探讨稀土的神经毒性提供实验依据。方法1．用中子活化分析方法浊定长期低剂量摄入氯化镧对大鼠脑中部分常量和微量元素含量的影响由中国医科大学实验动物中心提供的实验用1月龄雄性Wist8r大鼠60只。实验动物室温度17—23cc，相对湿度45—55％，动物饲料由实验动物中心提供。适应性喂养一周后，随机分为4组，每组15只。用LaCl，配成0．04彻0l、O．4姗ol、4皿Ⅱol(含镧量分别为5．56、55．6和556叫L)不同浓度的水溶液让大鼠自

5、由饮用，对照组饮用蒸馏水。染毒6个月后，采用乙醚麻醉法将大鼠麻醉，断头处死。在冰盘上快速取脑，蒸馏水清洗后擦干，从中间分成2部分，一部分用于测定各种生化指标，另一部分冷冻干燥后，用玛瑙研钵研细并混匀，用于元素含量测量。准确称量约100毫克冷冻干·1·燥后的鼠脑，短照样品用聚乙烯膜密封，长照样品用两层擦镜纸及高纯铝箔包裹，连同人工配制的多元素混合标准与样品分别送往中国原子能科学研究院的微型反应堆及重水反应堆进行照射。照射后样品采用高纯锗探测器、PCA—Il一8000多道分析器及P一Ⅳ计算机组成的微机多道系统

6、测量。该谱仪对60co1332keV能峰的分辨率为1．96keV，相对探测效率25％，峰康比48：1。2．断乳后，长期低剂量摄入氯化镧对成年大鼠学习记忆功能的影响动物分组和染毒方法同第一部分。染毒6个月后，进行电迷宫实验测试大鼠的学习、记忆能力。动物处死后，将取出的另一半鼠脑用生理盐水匀浆。采用Lowry法测定蛋白质含量、碱性羟胺比色法测定海马中乙酰胆碱(Ach)含量、及胆碱脂酶(Ac}IE)活性，采用定磷法进行Ca“一A11P酶的活性测定。3．长期低剂量作用下氯化镧对大鼠生殖及子代生理发育的影响2月龄雌

7、性wistar大鼠24只，适应性喂养一周后，随机分为4组，每组6只。染毒4周后，雌雄按2：l合笼，为避免雄性大鼠染毒量不同造成的差异，交配时间内饮用水改为蒸馏水，直至确认怀孕，归笼。待动物自然分娩后，观察并计算母鼠的受孕率、正常分娩率、幼仔成活率。对哺乳期子鼠的生理发育情况进行观察。观察指标：(1)生殖指标：受孕率、窝产子数、子鼠出生时体重、幼仔哺育成活率。(2)仔鼠生理发育情况：①出生后生长情况：动态观察子鼠在出生后第4天、8天、12天时体重。②耳廓分离：子鼠出生后第2天开始观察，一般在第3—4天耳廓完

8、全分离。③门齿萌生：第8天开始观察，标准通常是上下门齿均以长出齿龈。④睁眼：第10天开始观察，标准是双眼均已睁开。⑤爬行：是运动发育指标，通常在第2—4天进行观察，以腹部能着地进行行走为达标。⑥10秒钟平面翻正反射：在出生后第2日开始观察，将鼠仰卧在桌上，扶持5秒，然后放手，观察其翻正过来四肢着地的能力。规定每次试验若子鼠在10秒内翻过身且四肢着地为阳性反应。⑦对断乳一个月的子鼠进行学习记忆能力的测试及脑内酶学指标测定，方法同