具有抑制麦芽糖酶活性的乳酸菌筛选与其特性研究论文

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1、摘要具有抑制麦芽糖酶活性的乳酸菌筛选及其特性研究学科、专业：工科、食品科学硕士研究生姓名：吴彬彬指导教师：郭本恒教授麦芽糖酶是一种仪．葡萄糖苷酶(EC3．2．1．20)，本文以抑制麦芽糖酶为目的，采用a．葡萄糖苷酶抑制剂的体外筛选模型，筛选出具有较好麦芽糖酶抑制效果的乳酸菌菌株JH28。菌株JH28在MRS肉汤中生长后，其发酵上清及菌体破碎后的细胞裂解物均对麦芽糖酶有抑制作用。将从MRS肉汤培养的菌体细胞经过高压破碎、高速离心后，获得的细胞裂解物经截留分子量为1000Da的膜透析后，取透析液冻干，获得透析细胞裂解物(DCL)。测定不同浓度DC

2、L对麦芽糖酶的抑制活性，最高抑制率可达67．19％，经计算其IC50为4．12mg／mL。此外，该菌株的脱脂乳发酵上清对麦芽糖酶也有一定的抑制作用。菌株JH28经过细胞形态观察、培养特征、生理生化特性鉴定以及16srDNA全序列测定，鉴定为Lactobacilluscasei，其16srDNA全序列与LactobacillUScaseiATCC343具有100％的同源性。LactobacilluscaseiJH28的最适生长温度为37℃，最适生长pH为6．5。鉴于JH28具有较强的麦芽糖酶抑制活性，进一步考察了其作为益生菌应用的可能性，对其药

3、敏性、酸耐受性、胆盐耐受性、消化酶耐受性及NaCI耐受性进行了研究。L．caseiJH28药敏性试验结果表明，该菌株对试验的24种常见抗生素大多数呈现过敏性；L．caseiJH28在pH3．0环境下生长1h后存活率可达128％：三．caseiJI-128的胆盐最高耐受浓度为0．3％；NaCl最高耐受浓度为8％。LactobacilluscaseiJH28发酵菌体的丙酮提取物经证实具有麦芽糖酶抑制效果，进行薄层色谱分析(TLC)后在254nln紫外灯下可显示出五个不同组分，其中组分4对麦芽糖酶具有抑制作用，当其浓度为160lag／mL时对麦芽糖

4、酶抑制率为21．74％。关键词：糖尿病，抑制，麦芽糖酶，乳酸菌，筛选AbstractScreeningofLacticAcidBacteriawitllInhibitoryEffectonMaltaseandStudyonItsCharacteristiesSubjectandSpeciality：Engineering，FoodScienceMastergraduatestudent：BinbinWuFacultyadviser：BenhengGuo，ProTKSstudyusedan仅一glucosidase(EC3．2．1．20)inh

5、ibitorscreeningmodelinvitrotargetedatinhibitingmaltaseactivityandfoundbacterialstrainJH28thatcallwellinhibitmaltase(oneoftheoc．glucosidase)activity．Thesupematantandintra-cellularextractsofJH28fermentedinMRSbothhasinhibitactivityonmaltase．Differentconcentrationoftheintra-cel

6、lularextractsofJH28wasmeasuredwhilefreezedryingafterdialysis(MWCO1000Da,de-ionizedwaterasdialysate)，thehighestsuppressionratiocouldbe67．19％，andtheIC50calculatedis4．12mg／mL．JH28wasalsofoundinhibitoryeffectofthesupematantonmaltasewhilefermentedinskimmedmilk．，n圮morphological，p

7、hysiologicalcharacteristicsand16srDNAsequenceofstrainm28werestudiedandtheresultsshowedthatcharacteristiesofthisstrainwereessentiallyconsistentwithLactobacilluscasei．TheoptimumgrowthtemperatureofL．caseiJH28is37℃．astothepH，theoptimumis6．5．￡．caseiJI-128hasthehighabilitytoinhib

8、itmaltaseactivity．SOwestudiedthedrugsensitivity,tolerancetoacid．biblesaltandNaCl．1