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时间:2019-02-01
《具有抑制麦芽糖酶活性的乳酸菌筛选与其特性研究论文》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、摘要具有抑制麦芽糖酶活性的乳酸菌筛选及其特性研究学科、专业:工科、食品科学硕士研究生姓名:吴彬彬指导教师:郭本恒教授麦芽糖酶是一种仪.葡萄糖苷酶(EC3.2.1.20),本文以抑制麦芽糖酶为目的,采用a.葡萄糖苷酶抑制剂的体外筛选模型,筛选出具有较好麦芽糖酶抑制效果的乳酸菌菌株JH28。菌株JH28在MRS肉汤中生长后,其发酵上清及菌体破碎后的细胞裂解物均对麦芽糖酶有抑制作用。将从MRS肉汤培养的菌体细胞经过高压破碎、高速离心后,获得的细胞裂解物经截留分子量为1000Da的膜透析后,取透析液冻干,获得透析细胞裂解物(DCL)。测定不同浓度DC
2、L对麦芽糖酶的抑制活性,最高抑制率可达67.19%,经计算其IC50为4.12mg/mL。此外,该菌株的脱脂乳发酵上清对麦芽糖酶也有一定的抑制作用。菌株JH28经过细胞形态观察、培养特征、生理生化特性鉴定以及16srDNA全序列测定,鉴定为Lactobacilluscasei,其16srDNA全序列与LactobacillUScaseiATCC343具有100%的同源性。LactobacilluscaseiJH28的最适生长温度为37℃,最适生长pH为6.5。鉴于JH28具有较强的麦芽糖酶抑制活性,进一步考察了其作为益生菌应用的可能性,对其药
3、敏性、酸耐受性、胆盐耐受性、消化酶耐受性及NaCI耐受性进行了研究。L.caseiJH28药敏性试验结果表明,该菌株对试验的24种常见抗生素大多数呈现过敏性;L.caseiJH28在pH3.0环境下生长1h后存活率可达128%:三.caseiJI-128的胆盐最高耐受浓度为0.3%;NaCl最高耐受浓度为8%。LactobacilluscaseiJH28发酵菌体的丙酮提取物经证实具有麦芽糖酶抑制效果,进行薄层色谱分析(TLC)后在254nln紫外灯下可显示出五个不同组分,其中组分4对麦芽糖酶具有抑制作用,当其浓度为160lag/mL时对麦芽糖
4、酶抑制率为21.74%。关键词:糖尿病,抑制,麦芽糖酶,乳酸菌,筛选AbstractScreeningofLacticAcidBacteriawitllInhibitoryEffectonMaltaseandStudyonItsCharacteristiesSubjectandSpeciality:Engineering,FoodScienceMastergraduatestudent:BinbinWuFacultyadviser:BenhengGuo,ProTKSstudyusedan仅一glucosidase(EC3.2.1.20)inh
5、ibitorscreeningmodelinvitrotargetedatinhibitingmaltaseactivityandfoundbacterialstrainJH28thatcallwellinhibitmaltase(oneoftheoc.glucosidase)activity.Thesupematantandintra-cellularextractsofJH28fermentedinMRSbothhasinhibitactivityonmaltase.Differentconcentrationoftheintra-cel
6、lularextractsofJH28wasmeasuredwhilefreezedryingafterdialysis(MWCO1000Da,de-ionizedwaterasdialysate),thehighestsuppressionratiocouldbe67.19%,andtheIC50calculatedis4.12mg/mL.JH28wasalsofoundinhibitoryeffectofthesupematantonmaltasewhilefermentedinskimmedmilk.,n圮morphological,p
7、hysiologicalcharacteristicsand16srDNAsequenceofstrainm28werestudiedandtheresultsshowedthatcharacteristiesofthisstrainwereessentiallyconsistentwithLactobacilluscasei.TheoptimumgrowthtemperatureofL.caseiJH28is37℃.astothepH,theoptimumis6.5.£.caseiJI-128hasthehighabilitytoinhib
8、itmaltaseactivity.SOwestudiedthedrugsensitivity,tolerancetoacid.biblesaltandNaCl.1
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