蜂毒肽的分离纯化与其抗辐射作用机理研究

《蜂毒肽的分离纯化与其抗辐射作用机理研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、福建农林大学硕士学位论文蜂毒肽的分离纯化及其抗辐射作用机理研究摘要本文所述的蜂毒肽是通过对使用QF．1型超级蜜蜂电子自动取毒器采自福建农林大学蜂学学院教学蜂场的意大利蜜蜂蜂毒，经葡聚糖凝胶层析等分离纯化后，再经电泳对组分进行鉴定，证实其为电泳级纯度。通过腹腔注射蜂毒肽小鼠经钴60辐射后的存活时间、骨髓微核致变、染色体畸变和单细胞凝胶电泳(SCGE)等试验结果来评估蜂毒肽的抗辐射作用。采用MTT法测定各实验组小鼠脾细胞的转化率，以邻苯三酚自氧化体系和Fenton体系测定蜂毒肽对超氧阴离子和羟自由基的清除作用，探究了蜂毒肽的抗辐射主要作用机理。所得结果如下：1．蜂毒肽的抗辐射作用结果显示，蜂毒肽可

2、以有效提高受照射小鼠的平均存活时间和存活率，当照射前给小鼠腹腔注射低、中，高剂量(o．6、0．8、1．0mg／kg体重)蜂毒肽可以使小鼠的存活时间提高3．2、12．4、5．7天，存活率提高21．9％，52．6％，28．3％。蜂毒肽使受试组小鼠骨髓细胞微核率分别降低3．36‰、8．09‰、8．15‰，分别降低了26．4％、63．5％、64。O％，染色体畸变率分别下降了7。8％、17．1％、17．4％。，当照射前24小时给小鼠腹腔注射O．8mg／kg蜂毒肽时表现最佳，可以使小鼠的存活时间提高12．4天，存活率提高52．6％；小鼠的骨髓细胞微核率较空白对照组降低了8．09‰，下降率达64％；而受试组

3、小鼠的染色体畸变率比对照组下降了17．1％。SCGE试验发现，注射蜂毒肽的试验组骨髓细胞彗星细胞率明显高于未加入蜂毒肽的空白试验组，蜂毒肽使骨髓细胞彗星细胞率分别降低32，5％，57．6％，44．81％。没有注射蜂毒肽的空白对照组小鼠的骨髓细胞的彗尾长度明显高于其他实验组，注射蜂毒肽的小鼠骨髓细胞的彗尾长度比空白分别降低34．2％，40．3％，37．2％。证明了蜂毒肽可以有效的保护受照射小鼠的骨髓细胞DNA，减少DNA的辐射损伤。2．蜂毒肽的抗辐射作用机理受照射24小时后的小鼠的牌细胞进行体外培养，用M订法测定各实验组小鼠脾细胞的转化率．结果艟示：照射Iji『加入蜂毒肽可以提高小鼠脾细胞第l“

4、福建农林大学硕士学位论文蜂毒肚的分离纯化及其抗辐射作用机理研究转化率，低剂量(o．6mg／kg)l拘蜂毒肽可以使小鼠脾细胞转化率提高9．1％，中等剂量组(o．8mg／kg)的小鼠脾细胞转化率比空白组高了12．9％t高剂量组(1．Om班g)比空白组提高了15％。蜂毒肽抗辐射的作用机制之一是促进脾细胞的增殖，提高机体免疫力。以邻苯三酚自氧化体系和Fenton体系测定蜂毒肽对超氧阴离子和羟自由基的清除作用。试验结果显示，在反应体系中加入1叽l浓度为lOmg／ml、20mg／ml、30mg／ml的蜂毒肽时对超氧阴离子的清除率分别为31．23％、46．02％、67．39％，对羟自由基清除率为35．21％

5、、65．48％、61．97％。蜂毒肽对超氧阴离子和羟自由基都有较好的清除作用。以上试验结果充分证实蜂毒肽无论是在细胞分子生物学角度，还是在机体免疫力以及清除自由基等多方面表现具有很好的抗辐射，修复机体损伤的功能。不仅提供了我们蜂毒肽抗辐射的基础性研究结果，更重要是也为蜂疗临床应用提供理论指导。关键词：意大利蜂蜂毒肽；抗辐射作用；微核试验；染色体畸变；单细胞凝胶电泳(SCGE)第2页福建农林大学硕士学位论文蜂毒肽的分离纯化及其抗辐射作用机理研究AbstactThemelittinusedinthedissertationwasisolatedandpurifiedthroughpolydextr

6、angelfromhoneybee(Apismelliferalijustica)workervenomwhichwascollectedbyQF-1SuperAutoElectronicBV-CollectoratTeachingApiaryofBeeScienceCollegeinFujianAgricultureandForestUniversity．Theseparatedcomponentwasapprovedbyelectrophoresistobeatelectrophoreticpurification．Toevaluateitsradiation·proofeffectonm

7、iceinourexperiment，themelittinWasinjectedintotheabdomentalcavityofthemicebeforeexposedtotheC060．Thesurvivaltime，themicronucleusrateinbonemarrowcell，thechromosomeaberranceandtheresultofsinglecellgelele