类风湿性关节炎患者关节滑液和滑膜中γδt细胞的体外建系与功能的研究

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1、^中国协和医科大学硕士学位论文英文缩略语APCAntigenpresentingcellBSABovineserumalbuminCDClusterofdifferentiationCDRComplementarity—determiningregioncpmcountsperminuteFACSFluorescenceactivatedcellsorterFITCFluoresceinisothiocyanateHEPESN一2一Hydroxyethylpiperazine-N'-2一ethanes

2、ulfonicacidHHV一6Humanherpesvirus6HSPHeatshockprotein3H—TdR3H-thymidineIFNInterferonIgImmunoglobulinILInterleukinIPPIsopentenylpyrophosphateKIRKillerinhibitoryreceptorMcABMonoclonalantibodyD一2-MED一2一MercaptoethanolMtpMacrophageMHCMajorhistocompatibilityc

3、omplexM．tbMycobacteriumtuberculosisMTT3-(4，5一dimethylthiazol一2-y1)2，5一diphenyltetrazoliumbromideNKNaturalkillerPBMCPeripheralbloodmononuclearcellPBSPhosphate．bufferedsaline抗原呈递细胞牛血清白蛋白分化簇互补决定区每分钟脉冲数荧光激活细胞分选仪异硫氰酸荧光素N．2一羟乙基哌嗪一N’一2一乙磺酸6型疱疹病毒热休克蛋白氚标记胸腺嘧啶核苷干

4、扰素免疫球蛋白白细胞介素异戊酰焦磷酸盐杀伤细胞抑制性受体单克隆抗体6．2一巯基乙醇巨噬细胞主要组织相容性复合体结核分枝杆菌噻唑蓝自然杀伤细胞外周血单个核细胞磷酸缓冲盐水中国协和医科大学硕士学位论文英文缩略语PEPHAPOPOPPPORASDSDSSFSMTCRThTNFPhycoerythrinPhytohemagglutinin1，4-di一(2'-C5’一phenyloxazolyl)一benzene2,5一diphenyloxazoleRheumatoidarthritisStandarddev

5、iationSodiumdodecylsulfateSynovialfluidSynovialmembraneTcellreceptorThelperTumornecrosisfactor2藻红蛋白植物血凝素1，4一双一(2’一C5’苯基恶唑)苯2，5二苯基恶唑类风湿性关节炎标准差十二烷基磺酸钠滑液滑膜T细胞受体T辅助细胞肿瘤坏死因子中国协和医科大学硕士学位论文摘要中文摘要类风湿性关节炎(rheumatoidarthritis，RA)是一种常见的以关节组织慢性炎性病变为主要表现的自身免疫性疾病。／尽管

6、人们对RA的发病机理进行了大量的研究，所获资料对其复杂韵发病机制仍难有满意的解释。T细胞是RA关节滑膜浸润细胞中数量最多的一类炎症细胞，很多学者认为其在RA的发病机制中发挥着核心的作用。尽管较之ⅨpT细胞，Y6T细胞是外周淋巴细胞库中的小亚群，然而，越来越多的证据显示78T细胞在机体对病原微生物和寄生虫的免疫防御中起重要的作用，并且参与抗肿瘤免疫以及调控机体的自身稳定；同时，Y6T细胞在许多自身免疫性疾病中高频率的出现以及对自身抗原的反应性，提示其在自身免疫性疾病的发病机制中发挥着重要的作用。近年来对

7、于俩T细胞与RA之间关系的研究越来越多，其中一些现象尤其引人注意。在RA关节滑膜和滑液中可查到有yST细胞选择性扩增，并且，与外周IIX78T细胞主要表现为V79／V82亚型不同，多数RA病例的关节滑液或滑膜中以VSl亚型细胞占有优势。这些yST细胞识别何种抗原?以何种方式识别抗原?表现出怎样的生物学功能?澄清上述问题，有助于了解yST细胞在自身免疫性疾病中的性质与作用，并为阐NyST细胞在RA发病机制中的作用提供资料q』本文应用固相抗TCRY6单克隆抗体扩增法，建立RA关节滑液、滑膜和外周血78T细

8、胞系，并在此基础上，对关节滑液、滑膜及外周血yST细胞的细胞表型、以及VSl+T细胞的增殖活性、细胞毒活性和细胞因子的分泌情况进行了系统的研究。(应用固相抗TcRY6单克隆抗体扩增法能够获得高纯度的RA滑液、滑膜以及外周nmy8T细胞系，其中Y6T细胞所占的比例分主垦塑塑墨型茎兰墼主堂垡堡塞塑塞别为83+_9％，90+7％和87+14％，这为深入研究yST细胞的功能奠定了良好的基础。通过对所建立的细胞系进行免疫荧光染色分析发现，RA病例滑液及滑膜76T细