空肠弯曲菌基因突变与致gbs的关联性研究

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1、中文摘要空肠弯曲菌基因突变与致GBS的关联性研究摘要空肠弯曲菌(Campylobacterjejuni，C．jejuni，Cj)是细菌性腹泻最常见的致病菌之一，吉兰一巴雷综合征(Guillain—Barresyndrome，GBS)是C．jejuni感染后的严重并发症。近年来随着神经生理和病理学的研究进展，将GBS重新划分为急性炎症性脱髓鞘性多发性神经病(mDP)、急性运动轴索性神经病(AMAN)、急性运动感觉性轴索性神经病(AMSAN)、Miller--Fisher综合征(MFS)等几种亚型。GBS的发生常与C．jejuni某些特定的血清型有关，在我国最常见的为O

2、：19。本研究从基因突变的角度出发，选择本地区的具有致GBS致病性的空肠弯曲菌菌株，针对不同的基因片段(鞭毛flaA，脂寡糖wla基因簇)，与NCTClll68序列比对分析，观察基因突变与致GBS的关联。方法>细菌培养选取AMAN型GBS病人来源的Cjejuni菌株，菌株经鸡、猴等动物模型证实为GBS的AMAN型致病菌株。血清分型为pennerO：19型。采用李春岩院士的培养方法培养q·>DNA提取应用promega公司的Wizard基因提取试剂盒，提取q基因组DNA。中文摘要>PCR扩增参考以往文献，进行PCR扩增，经电泳证实PCR产物。>测序PCR产物经电泳证实

3、后，由上海生物公司测序。>序列分析应用DNAstar4．0软件和NCBI数据库的BLAST，与已公布基因组全序列的空肠弯曲菌NCTClll68菌株序列进行对比分析。结果1本研究菌株与NCTCl1168菌株序列分析结果表示在两株菌株之间，核苷酸序列同源性达97％以上。2flaA基因和wla基因簇不同基因片断，核苷酸突变的数量不同，以flaA基因和wlaF突变最多，分别为20个核苷酸突变；15个核苷酸突变。3氨基酸变异与核苷酸突变相似，以flaA基因和wlaF最多，分别13个氨基酸变异；60个氨基酸变异，并且由于wlaF序列存在5个核苷酸缺失，引起连续的氨基酸变异。结论

4、通过与NCTClll68序列对比分析，发现在flaA基因和wla基因簇共存在90处的核苷酸突变和91处氨基酸变异．本研究从分子遗传水平了解C．jejuni致GBS的发病机制，并为进一步研究GBS相关C．jejuni的分子生物学特征奠定基础。关键词：吉兰一巴雷综合征；空肠弯曲菌；flaA基中文摘要因：脂寡糖；wla基因簇英文摘要StudyforMutationsofaCampylobacterjejunistrainassociatedGuillain-Barr6SyndromeCampylobacterjejuni(Cjejml_i)isthemostfrequen

5、tcauseofbacterialdiarrhea．Guillain-Barrdsyndrome(GBS)isaseverecomplicationafterC．jejuniinfect．RecentneurophysiologicalandpathologicalstudieshaveledtoareclassificationofGBSintoacuteinflammatorydemyelinatingpolyneuropathy(AIDP)、acutemotoraxonalneuropathy(A㈣、acutemotorandsensoryaxonalneur

6、opathy(AMSAN)、Miller-Fishersyndrome(MFS)．ThedevelopmentofGBSareassociatedwithcertainCjejuIlistrainswithspecificserotype．TheconlnlonstrainisPennerO：19inourcountry．InOurstudy,weanalyzemutationofGBS—associatedC．jejuniwhichisolatedfromaGBSpatientinournorthernareaofChina．Wesearchthedifferen

7、tbetweenNCTCl1168andGBS—associatedCjejuniatflaAandwlacluster．TheaimofthisstudyWastoinvestigatetherelationofGuillain-BarrdSyndromeandCampylobacterjejunimutations。Methods>Bacteriaculture：Theqstrainweusedwasisolated4英文摘要fromAMANpatient，andidentifiedwithAMAN-associatedstrainbymodelanimal