不同缺失突变的丙型肝炎病毒核蛋白在大肠杆菌中的表达

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1、独创性声明秉承学校严谨的学风与优良的科学道嚣，本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽藐所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过昀研究成果，不包含本八藏他人已申请学位或其他用途使用过的戚果。与藐一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了致谢。申请学位论文与资料若肓不实之处，本人承担一切相关责任。．，论文作者签名：j鱼才丑日期：!QQ』：!：』保护知识产权声明本人完全了解第四军医大学有关保护知识产权的规定，即：研究生在校攻读学位期闻论文工作的知识产权单位屠第四军医

2、大学。本人保证毕业离校后，发表论文或使用论文工作成果耐署名单位仍然为第四军医大学。学校可以公布论文的全部或部分内容(含电子版，保密内容除外)，可以采用影印，缩印或其他复材手段保存论文。学校有权允许论文被杳闲和借阅，并在较圄网上提供论文内容的溯览和下载服务。论文作者签名：业导-签各：4∑继日撕：塑!笸：￡!第四军医大学硕士学位论文缩略语表英文缩写英文全名中文译名aaaminoacids氨基酸Agantigen抗原Ampampicillin氨苄青霉素APCantigenpresentcell抗原提呈细胞bpbasepairs碱基对BSAbovineserumal

3、bumin牛血清白蛋白CTLcytotoxicTlymphocyte细胞毒T淋巴细胞dNTPdeoxynueleosidetriphosphate脱氧三磷酸核苷DTHdelayedtypehypersensitivity迟发型超敏反应E．coliEseherichiacoli大肠杆菌EDTAethylenediaminetetmcetieacid乙二胺四乙酸ERendoplasmicreticulum内质网GM．CSF铲掣10。誓。-macro唑ag。粒．巨噬细胞集落刺激因子colony-sttmulatmgtactorHBVhepatitisBvirus乙

4、型肝炎病毒HCChepatocellularearcinoma肝细胞肝癌HCVhepatitisCVlI'US丙型肝炎病毒hnRNPhc甲8。neou8．．核不均一核糖核蛋白nuclearrlbonucleoprotcmHR_Phorseradishperoxidase辣根过氧化物酶HVRhypervariableregion高变区IFNinterferon干扰素第四军医大学硕士学位论文IgILKDLBNCoDORFPAGEPBMCPBSPCRtomSDSnTETNFTrisⅥ毋immunoglobulininterleukinHloDaltonLuriaB

5、ro也nitrocelluloseopticaldensityopenreading丘8．mepolyaerylamidegelelectrophoreperipheralbloodmononudearcellphosphatebufferedsalJ21epolymerasechainreactionrevolutionsperminutesodiumdodecylsulfatehelperTlymphocyteTris芒D弼bufferttlnaornecrosisfactorTrihydroxymethylaminomethaneWestemblot2

6、免疫球蛋白白细胞介素千道尔顿LB肉汤培养基硝酸纤维素光密度开放读码框聚丙烯酰胺凝胶电泳外周血单个核细胞磷酸盐缓冲液聚合酶链反应每分钟转数十二烷基硫酸钠辅助性T淋巴细胞TE缓冲液肿瘤坏死因子三羧甲基氨基甲烷免疫印迹第四军医大学硕士学位论文不同缺失突变的丙型肝炎病毒核蛋白在大肠杆菌中的表达硕士研究生：沈才飞导师：白雪帆教授辅导教师：黄长形副主任医师第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心西安710038中文摘要丙型肝炎病毒(hepatitisCvirus，HCV)感染已成为全球性的公共卫生问题。WHO1999年统计表明，全球目前约有1．7亿人感染HCV．约占全球人

7、口的3％。据估计，每年新增HCV感染人数约为300～400万。丙型肝炎最大的特点是高度慢性化，慢性化率为50％～85％。一部分HCV慢性感染者可演化成肝硬化、肝癌等终末期肝病。丙型肝炎病毒高度变异的特性给疫苗的研制带来了极大的困难。由于HCV核蛋白相对保守，不同型和亚型的HCV株之间有共同的体液和细胞免疫抗原位点，长期以来作为HCV疫苗的各选抗原一直是研究热点。研究发现，HCV核蛋白可以诱导CTL反应及ADCC，但完整的核蛋白在体外表达水平低，用完整的核蛋白基因进行DNA免疫不能诱导小鼠产生高水平的CTL反应。研究者应用多种策略对核蛋白DNA疫苗进行优化，但

8、仍未达到理想效果。核蛋1自DNA疫苗在细胞内表达量不