一维凝胶电泳技术在血清差异蛋白质组学中的应用分析

《一维凝胶电泳技术在血清差异蛋白质组学中的应用分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、=缝篮膣曳遂夔鲞查鱼遗差昱堡．鱼厦堑堂生笪廛旦受塞至QQ!堡亟±堂僮诠塞TGF·131transforminggrowthfactor-betal转化生长因子131GP73golgiprotein73高尔基糖蛋白一73Mn-SODsuperoxidedismutase．Mn锰一超氧化物歧化酶VEGFvascularendothelialgrowthfactorgll管内皮生长因子NY-ESO—lNYesophagealsquamouscellcarcinoma1纽约食管鳞状细胞癌．1二箜熊壁皇鎏嚣垄廷堡适量基丝旦丛塑堂里盟厘厦丝珏兰!!盟錾丝圭望焦丝塞独创

2、声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含未获得或其他教育机构的学位或证书使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：拭炼形签字日期：弘f口年，月，，z日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解广西医科大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权广西医科大学可以将学位论文的全部或部

3、分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权中国学术期刊(光盘版)电子杂志社、中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》、《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。学位论文作者签名：腻娥，飞导师签字：A刁恢签字日期：沙fo年s月f(，日签字日期：>d一年r月，切‘日=丝燧膣鱼速挂鲞垄查渲羞昱量自厦玺堂史鳆堡厦煎壅一至QQZ缓亟±堂鱼途塞．j‘—Jk刖吾随着人类基因组完整工作草图的公布及全部测序任务的完成，生命科学研究的重心由结构基因组学转向功能基因组学。作

4、为功能基因组学研究重要内容的蛋白质组学(proteomics)，已成为2l世纪生命科学的焦点之一n1。蛋白质组源于蛋白质(protein)与基因组(genome)两个字的杂合，意指proteinsexpressedbyagenome，即“一个细胞或一个组织基因组所表达的全部蛋白质川引。由于蛋白质的种类和数量处在一个新陈代谢的动态过程中，同一细胞的不同周期、不同的生长条件下，所表达的蛋白质不尽不同。因此，蛋白质组作为一个整体，在时间和空间上是动态变化的口3。而蛋白质组学(proteomics)即是从整体的角度分析细胞内动态变化的蛋白质组成成分、表达水平与修饰

5、状态，了解蛋白质之间的相互作用与联系，揭示蛋白质功能与细胞生命活动规律，是应用各种技术手段来研究蛋白质组的一门新兴科学H儿朝。在各种生物数据库不断产生和完善，各类高通量、高灵敏度、高分辨率的色谱技术、质谱技术、芯片技术的不断发展的今天，蛋白质组学研究获得了快速的发展，并已越来越广泛地应用于临床医学，为人类认识自我、保护自我、预防和战胜疾病等寻找根本的答案。血清蛋白质组学(serumproteomics)是蛋白质组学的一个重要分支，是指研究选定的目标人群血清中表达的全部或部分蛋白质，在建立正常蛋白质表达图谱(proteinexpressionmap，PEM)

6、的基础上，寻找其差异蛋白质点，鉴定疾病相关蛋白质，进而研究其结构和功能，为研究重大疾病病理生理学机制、早期诊断的特异性标志物、药物作用靶点等开辟新的途径№1。随着蛋白质组学研究的深入，人们开始探索采用肿瘤免疫学与蛋白质组学相结合的方法——肿瘤血清蛋白质组分析方法(tumorserologicproteomeanalysis，SERPA)寻找肿瘤相关抗原口3。从肿瘤免疫学的观点来看，肿瘤细胞是“非已细胞”，肿瘤细胞总是或多或少地表达区别于正常细胞的肿瘤l二丝筮膣亟选蘧莶垄鱼遣羞羞堑旦厦缉堂主鲤蹙旦亟荭至QQZ壁亟主堂僮迨塞抗原，因而，在患者血清中极有可能存在

7、其相应的抗体，所以，可以结合蛋白质组学技术分离肿瘤细胞内成千上万个蛋白质的优势和抗原抗体反应高度特异性的特点，筛选与肿瘤密切相关的抗原陋1。按照这一思路，可采用二维凝胶电泳技术分离肿瘤组织、癌旁正常组织的蛋白质，并采用质谱分析和生物信息学方法对平行胶(replleagel)中相应的差异蛋白质点进行鉴定，筛选出肿瘤相关蛋白。实践中2-DE暴露出不少缺陷，比如：需要的上样量比较大；操作复杂，步骤多，个体差异难以控制；对于低丰度蛋白、疏水性蛋白、极碱性蛋白(pI>10)、一些极大蛋白(>200ku)和极小蛋白(

8、在肿瘤发生与发展过程中发挥着关键作用的低丰度的分泌蛋白质，如细胞因