栀子浸膏治疗兔膝骨性关节炎实验的研究

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1、内容摘要目的：通过观察栀子浸膏对兔膝骨关节炎模型关节软骨形态,软骨基质中Ⅱ型胶原和蛋白多糖含量，软骨、滑膜、血清及关节液中IL-1表达的影响，探讨其治疗骨关节炎的作用机制，为栀子治疗骨关节炎提供理论依据。方法：健康六月龄大耳白兔35只，雄性18只，雌性17只，体重1.5～2.0kg，随机分为5组：正常对照组（A组）、模型组（B组）、高剂量组（C组）、中剂量组（D组）、低剂量组（E组）。A组打开关节腔后不作任何处理逐层缝合手术切口，B、C、D、UE四组行改良Hulth法造模，术后每天给予青霉素40万/只肌肉注射，连续7天，预防感染。适应性喂养1周后，每日驱赶各组实验动物活动0.5h

2、,2次/天，术后5周,对兔膝关节进行X线摄片判断造模成功。A与B组给予生理盐水2ml/kg·d灌胃，C、D、E组分别给予600mg/kg·d、300mg/kg·d、150mg/kg·d栀子浸膏灌胃，连续给药3周后，每组随机抽取实验动物2只，拍摄兔膝关节X线片；将全部动物处死前，分别采集关节液、血液检测IL-1β含量；对关节软骨行组织学观察、免疫组织化学法检测IL-1及Ⅱ型胶原表达情况；取滑膜行免疫组织化学法检测IL-1含量；Masson染色与甲苯胺蓝染色分别检测软骨基质中胶原和蛋白多糖含量；并对软骨细胞行透射电镜进行超微结构观察。所有数据经统计学分析处理。结果：（1）X线片观察A

3、组关节无明显变化；B组关节内侧间隙明显变窄，关节面粗糙变形，关节边缘有骨赘形成，软骨下骨骨密度明显增高；C、D与E组关节退行性变化较B组轻。（2）肉眼、光镜、透射电镜观察与A组相比，B组关节软骨呈明显退行性变，退变程度重；C、D、E组关节软骨退行性变程度较B组轻；C、D、E组中C组关节软骨退变程度最轻，E组关节软骨退变程度最重，D组变化介于C与E组之间。（3）PelletierJP及Mankin’s评分与A组相比，B组关节软骨PelletierJP及Mankin’s评分显著升高（P<0.05）；C、D、E组关节软骨评分都较B组低（P<0.05）；C、D、E组间关节软骨评分有差异（

4、P<0.05）。（4）软骨基质中蛋白多糖含量A、C、D与E组蛋白多糖含量明显高于B组（P<0.05），C、D、E组间蛋白多糖含量有差异（P<0.05）。（5）软骨基质中胶原含量A、C、D与E组胶原含量明显高于B组（P<0.05），C、D、E组间胶原含量有差异（P<0.05）。（6）免疫组化SP法检测关节软骨IL-1与B组比较A、C、D与E组IL-1含量明显降低（P<0.05），C、D、E组间IL-1含量有差异（P<0.05）。（7）免疫组化SP法检测关节滑膜IL-1A、C、D与E组较B组滑膜IL-1含量低（P<0.05），C、D、E组间IL-1含量有差异（P<0.05）。II（8

5、）ELISA法检测血清与关节液IL-1βA、C、D与E组血清、关节液中IL-1β含量较B组低（P<0.05），C、D、E组间IL-1β含量有差异（P<0.05）。结论：栀子浸膏能减轻兔膝骨关节炎模型关节软骨退行性变，延缓病程的进展，其作用机理可能与下调IL-1水平，抑制滑膜炎症，降低软骨基质中蛋白多糖与Ⅱ型胶原的降解有关。关键词：骨关节炎栀子关节软骨白介素-1Ⅱ型胶原蛋白多糖IIIAbstractObjective：TodiscusstheeffectandpossibleactionmechanismoftheextractofGardeniaJasminoidesEllisb

6、ythedeterminationofmorpbologychangeofaticularcartilage,thecontentoftypeⅡcollagenandproteoglycansingroungsubstanceofcartilage,andthelevelsofIL-1inaticularcartilage,synovialmembranes,serumandsynovialfluidinosteoarthritismodelrabbits.AndtoprovidescientificbasisoftreatingosteoarthritiswithGardeni

7、aJasminoidesEllis.Methods:35flap-earedwhiterabbits,bodyweightfrom1.5kgto2.0kg,wererandomlydividedintofivegroups:thenormalcontrolgroup(GroupA),modelgroup(GroupB),hightdosegroup(GroupC),middledosegroup(GroupD)andlowdosegroup(GroupE).Therabbitsi