大鼠胃粘膜损伤的随龄变化

大鼠胃粘膜损伤的随龄变化

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时间:2019-02-01

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1、军医进修学院硕士学位论文大鼠胃粘膜损伤的随龄变化中文摘要目的:1,比较大鼠胃粘膜组织结构和胃蛋白酶含量的随龄变化。2、应用阿司匹林及奥美拉唑制备老龄和非老龄大鼠的损伤和保护模型。比较损伤和保护因素对不同月龄大鼠胃粘膜和血液NO、TNF含量影响,并探讨其作用机制。方法:选择月龄3个月,体重200—3009及月龄22个月,体重600—8009清洁级健康WiStar大鼠各18只,分别随机分为3组:老龄、非老龄阿司匹林损伤组,老龄、非老龄奥美拉唑保护组和老龄、非老龄对照组。1、光镜下观察老龄、非老龄对照组大鼠胃粘膜腺体及肌层厚度,固有腺体

2、数量及炎性细胞浸润程度。胃蛋白酶试剂盒生化检测胃粘膜组织胃蛋白酶活力。免疫组化方法检测大鼠粘膜PCNA的表达。2、老龄、非老龄阿司匹林损伤组大鼠分别用100mg/kg剂量阿司匹林灌胃;老龄、非老龄保护组大鼠分别用20mg/kg剂量奥美拉唑灌胃。老龄、非老龄对照组大鼠分别给予生理盐水灌胃。处死前眼球内眦静脉取血并分离血浆和血清,检测血浆NO含量、NOS、iNOS及cNOS活力。放射免疫法测血清TNF含量。分别按Guth评分标准大体观察及whittle评分标准光镜下观察,比较各组大鼠胃粘膜损伤情况。结果:1、老龄对照组大鼠胃粘膜色泽苍

3、白、表面光滑、皱襞规整、表面可见附着较多粘液。非老龄对照组大鼠胃粘膜色泽橘红、表面光滑、皱襞规整、表面亦附着较多粘液。老龄和非老龄对照组大鼠胃体和胃窦粘膜均未见肠上皮化生、不典型增生及肿瘤的发生。老龄对照组大鼠胃窦粘膜固有层腺体数量减少、腺体间隙增大,固有层腺体层数减少,甚至消失;非老龄对照组大鼠胃窦粘膜固有腺体饱满清晰、层教较多。老龄对照组大鼠胃窦粘膜厚度高于非老龄大鼠的胃窦粘膜厚度,但老龄对照组大鼠胃体粘膜厚度与非老龄对照组大鼠胃体粘膜厚度相比无统计学意义。老龄对照组大鼠的胃窦、胃体的粘膜肌层较非老龄对照组大鼠的粘膜肌层增厚,

4、镜下可见粘膜肌层向粘膜固有层呈分支状插入腺体之间。老龄对照组大鼠胃液PH值较非老龄对照组PH值略高,但两者比较无统计学意义(P>0.05)。老龄对照组大鼠胃粘膜组织的蛋军医进修学院硕士学位论文白酶含量下降,与非老龄大鼠比较有统计学差别(P<0.05)。非老龄对照组大鼠胃粘膜中PCNAItn性细胞主要定位于胃腺颈部增殖细胞带,表达规律,细胞核染色阳性,粘膜表面上皮细胞为阴性。阳性信号较均一,呈颗粒样或片状棕黄色染色,有时胞浆也有轻度黄染或呈淡紫色。老龄对照组大鼠PCNA表达阳性细胞也呈颗粒状或片状棕黄色染色,阳性表达的胃颈腺增殖细胞

5、带厚度降低且位置下移,偏向于粘膜肌层。老龄对照组大鼠较非老龄对照组大鼠NO、NOS、iNOS及TNF含量升高,cNOS含量下降,统计学差别明显,这说明伴随增龄,由cNOS产生的内源保护性NO含量下降,而由iNOS产生NO含量升高,且后者升高的量大于前者下降的量,从而表现为总体N0含量升高。NO和TNF含量升高推测与老化后自由基产生过多或清除减少引起细胞结构破坏而功能丧失,最终导致机体的衰老。。2、老龄和非老龄阿司匹林损伤组大鼠胃粘膜均可见散在点(线、片)状出血点(带),老龄损伤组大鼠损伤面积大、范围广,损伤指数高于非老龄大鼠损伤指

6、数(P<0.05)。镜下观察两组损伤大鼠粘膜粘膜腺体有不同程度的充血、水肿、上皮缺损、连续性破坏,伴有不同程度的炎性渗出及炎症细胞(中性粒、淋巴和单核细胞)浸润。老龄损伤组大鼠镜下whittle评分高于非老龄损伤组大鼠whitle评分(P<0.05)。给予奥美拉唑预保护后再给予阿司匹林灌胃,两保护组大鼠胃粘膜亦可见粘膜出血和糜烂,但损伤程度较相应的老龄和非老龄损伤组轻,糜烂及出血范围减少,部分大鼠粘膜仅见少量点状出血。镜下观察发现给予奥美拉唑保护后两组大鼠粘膜充血水肿、上皮缺损破坏及炎性渗出、炎症细胞浸润程度均较单纯损伤组程度轻。

7、分别对老龄、非老龄对照组、损伤组及保护组大鼠进行组间分析发现:老龄、非老龄损伤组大鼠的TNF含量、NO含量、NOS活力及iNOS活力升高,cNOS活力下降,与对照组比较有统计学差别。老龄、非老龄保护组与相对应的阿司匹林损伤组比较,NO含量降低,但仍高于相应对照组的NO值(P<0.05);老龄和非老龄保护组NOS活力低于损伤组,高于对照组,但统计学比较无明显差别(P>0.05);老龄保护组iNOS活力较损伤组下降(P<0.01),较对照组升高(P>0.05),非老龄保护组iNOS活力较损伤组降低较对照组升高(P<0.01);老龄、非

8、老龄保护组cNOS均较相应的损伤组升高(P<0.05)较相应的对照组比较无统计军医进修学院硕士学位论文学差别(P>0.05);老龄、非老龄保护组TNF含量较损伤组降低(P<0.05),但与对假组相比无统计学意义(P>0.05)。胃粘膜损伤指数与iN

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