大鼠退变椎间盘中环氧化酶-2、缺氧诱导因子-1α的表达与其与血管生成的关系

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时间:2019-01-31

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1、摘要独饲养。对照组不行手术,与实验组同等条件饲养。12周后,处死所有大鼠,取腰4/5椎问盘,制成4um厚的病理切片。每个配对中,对照组大鼠的切片通过H.E染色用于跟实验组比较,以反映实验组大鼠椎间盘的退变情况,对照组切片亦行免疫组化染色,但不记录相关数据,仅作阴性对照。通过免疫组化方法检测两组实验动物椎间盘中COX-2、HIF.1a表达情况及CD34标记的新生血管在退变椎间盘及正常椎间盘中表达状况,并计数椎间盘中微血管的密度(m),记录实验组相关数据。并通过统计分析描述退变椎间盘中COX-2与HIF.1a之间的关系及它们分别与椎间盘微血管密度(MVD)之

2、间的关系。研究结果1.所有大鼠试验期间全部存活:2.光镜检测结果:.对照组大鼠椎间盘组织切片经HE染色后,光镜下可见髓核组织中胶原纤维相互平行排列,纤维粗细较均匀,未见裂隙和囊泡状空腔;而而实验组的椎间盘髓核组织中纤维细胞增生明显,胶原纤维排列紊乱、粗细不均,甚至发生断裂,并可见大量纤维软骨样组织,髓核基质发生玻璃样变性。HE染色片表现为淡红色的细胞团,可见散在的或呈灶状的坏死区,部分坏死物已经发生液化、吸收,残留下大小不一、长短不等的囊泡状、蜂窝状的裂隙和空腔;3.免疫组化染色结果:经免疫组化染色后发现HIF.1a和COX.2在正常的椎间盘髓核中仅有微

3、弱表达,但在退变的髓核内其表达明显增加,COX.2在切片上的染色阳性部位大部分为椎间盘髓核细胞的胞质或胞膜,镜下表现为髓核细胞胞质或胞膜上出现棕黄色的染色颗粒,并且附近大多有新生血管生成。而HIF.1a因子在切片上的染色阳性部位大部分为椎间盘髓核细胞的胞质与胞核,镜下表现为髓核细胞胞质或胞核上出现棕黄色染色颗粒,并且出现染色阳性细胞的部位与表达COX.2的阳性细胞的位置存在明显重叠。用CD34标记的微血管经免疫组化染色后,镜下表现为棕色的单个内皮细胞或内皮细胞簇。在正常的髓核组织中未出现或仅少量出现阳性结果,但是在退变的髓核中其阳性结果明显增多。硕士学位

4、论文4.统计学分析结果:将本实验所获数据输入SPSSl3.0,经直线相关分析,退变椎间盘髓核组织内COX-2、HIF.1a之间呈显著正相关关系(r=O.705.P=0.023);用多元线性回归分析COX.2及HIF.1a的表达与MVD呈正相关关系;决定系数R2=O.875,COX.2的标准化回归系数为0.496,HIF.1a的标准化回归系数为O.517。结论本实验利用制作动物模型及免疫组化染色方法,检测大鼠退变腰椎间盘中COX.2、HIF.1a的表达及新生血管密度(MVD)得出以下结论:1.HIF.1a、COX.2在大鼠退变的髓核组织内其表达明显增加;2

5、.大鼠退变椎间盘髓核组织内COX.2、HIF.1a因子的表达呈正相关关系;3.大鼠退变椎间盘髓核组织中MVD值与COX.2因子表达呈正相关关系;4.大鼠退变椎间盘髓核组织中MVD值与HIF.1a因子表达呈正相关关系。关键词:大鼠退变椎间盘环氧化酶.2缺氧诱导因子.1a新生血管形成V硕士学位论文ThecorrelationshipbetweentheexpressionofcVclooxVgenase.2,hypoxia.inducibleuciDleCVCl00XVgenaSe一·一IaCtor-1伐annp●1●anglogenesls●■lnIUmD

6、arintervertebraldiscdegenerationofratsName:YeWen-mingSupervisor:ZhuLi—xinABSTRACTAveragelifespanofthecitizenislongerthanbeforebecauseofthedevelopmentoftheeconomy,medicaltechnologyandthestandardoflivingenjoyedbyourpeople.Buttheproblemcausebyageingcailhemperedtheimprovementofliving

7、standards,therefore,it’Safullofcontradictionsandurgentproblem.Itmainlyembodiedintheincreaseofprevalencerateofgeronticillness,includespinaldegenerativedisease,whichhaveahighmorbidityrateanddisorderpeople’Slifeseriously.Thelocalpathologicalanatomyandpathologicalphysiologychangescau

8、sedbylumbardegenerativechangesnotonlyCan

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