博尔纳病病毒磷蛋白的原核表达和p24片段荧光定量pcr试剂盒的研制开发

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4、PolymerasechainreactionPowerofhydrogenRibonucleicacidRevolutionsperminuteReversetranscriptasePCRSecondSodiumdodecylsulfate6-carboxy-tetramethyl-rhodamineThermusaquaticusTrisbufferedsalineTetramethylammoniumchlorideTrishydroxymethylaminomethaneWesternBlotMicroliterMicron2中文全称毫升毫摩尔每升阴性对照光密度少突胶质细胞开

5、放读码框博尔纳病病毒磷蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳聚合酶链式反应酸碱度核糖核酸每分钟转速逆转录酶聚合酶链反应秒十二烷基硫酸钠6．羧基四甲基若丹明嗜热水生菌三羟甲基氨基甲烷缓冲液四甲基氯化铵三羟甲基氨基甲烷免疫印迹分析微升微米重庆医科大学硕士研究生学位论文博尔纳病病毒磷蛋白的原核表达和p24片段荧光定量’PCR试剂盒的研制开发．▲上_-J一刖吾博尔纳病病毒(BDV)是一种具有很强嗜神经性的单负链RNA病毒，是博尔纳病(BD)的病原体【ll。BD于19世纪首次在德国博尔纳镇军用马匹中爆发流行，这也是博尔纳病名称的由来。BDV宿主范围很广泛，除了主要宿主为马和羊外，后来的研究发现包括啮齿类、鸟类和

6、灵长类等众多温血动物都是BDV的宿主，而近些年越来越多的报道推断BDV也可能于人类精神疾病有关121，在我国新疆、宁夏和重庆等地区动物和脑炎患者中也发现散在BDV疑似阳性病例报导【3巧】。BDV基因组全长8．9kb，至少能编码6种病毒蛋白，其中开放式读码框(ORF)II编码磷蛋白(p24蛋白)。磷蛋白在博尔纳病病毒的致病过程中可能也发挥着重要的作用，而p24基因由于序列高度保守【61，并且在检测同等病毒量时其敏感性要高于p40基因【7】，故是检测BDV核酸的主要指标。同时刺激机体产生的抗体也是检测博尔纳病病毒是否曾经或正存在感染的重要依据。目前针对博尔纳病病毒的检测方面主要包括血清学检

7、测、核酸检测、病毒分离等，1985年第一次报道用检测抗体的方法来研究抑郁症和其他精神障碍病人是否存在BDV感染，虽然BDV与神经精神疾病是否存在关联现在尚且有争议，但仍需进一步对其进行研究，如果的确存在某种关联，那对人类神经精神疾病的发病机制研究和治疗将带来革命性的影响，我国人口众多，抑郁症和其他精神疾病的发病率仍居高不下，目前国内对于这方面的研究尚未广泛开展。BDV由于在体内复制率低，需要建立特异性和敏感性高并且方便快速的检测方法进行筛查。本