阿托伐他汀对大鼠心肌制备再灌注损伤后hspg、s某c-1表达影响

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1、重庆医科大学硕士研究生学位论文M田UHSHSPGSDC．1LADPGGAGmlnm1ELISART．PCR英汉缩略语名词对照myocardialischemiareperfusioninjury心肌缺血再灌注损伤heparansulphate硫酸乙酰肝素heparansulphateproteoglycans硫酸乙酰肝素蛋白聚糖Syndecan-1多配体蛋白聚糖一1leftanteriordescendingcoronaryarteries冠状动脉左前降支proteoglycansGlycosaminog

2、lycanMinutesMillimeter蛋白聚糖葡胺聚糖分钟毫升enzymelinkedimmunosorbentassay酶联免疫吸附法reversetranscriptionpolymerasechainreacti．反转录多聚酶链式反应0n重庆医科大学硕士研究生学位论文阿托伐他汀对大鼠心肌缺血再灌注损伤后HSPG、SDC-1表达影响前言心肌缺血、心脏手术或循环阻滞后再灌注损伤，可导致心血管不良后果。首先，无血液灌注可导致氧供需失衡，造成心肌组织损害或功能障碍。自然，早期和快速恢复血流，是防止组织

3、进一步损伤的首选治疗。事实上，使用溶栓治疗或经皮冠状动脉介入术是减少心肌梗死面积和提高临床疗效最有效的措施。但是，恢复缺血心肌的血流供应，称为再灌注，可诱发或加重组织损伤，这种现象被称为心肌缺血再灌注损伤(myocardialischemiareperfusioninjury,MIRI)n1。随后的急性心肌梗死动物模型研究表明‘21，心肌缺血再灌注损伤大约占心肌梗死面积的50％。目前认为MIRI的重要发病环节与氧自由基损伤作用、细胞内钙超载、白细胞与微血管功能障碍有关，但其发生机制尚未完全阐明。因此，许多

4、研究员正致力于研究心肌缺血再灌注损伤的潜在机制，从而为减少心肌梗死面积提供更为有利的治疗预防措施。硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(heparansulphateproteoglycans，HSPG)是细胞膜及细胞外基质中的一种蛋白聚糖，由一个核心蛋白(coreprotein)分子与一个活数个糖胺聚糖(glycosaminoglycan，GAG)通过糖苷键共价连接的线形硫酸乙酰肝素(heparansulfate，HS)链结合生成的生物大分子B1。通过其结构的特异性和同细胞信号传导的密切关系，参与多种重要的生物学功能H

5、。71，如维持血管壁的抗凝表面、防止血栓形成，维持血管通透性，抑制细胞粘附，参与某些生长因子与其受体的结合，调节细胞的增殖等。由于其多样化的结构功能和在细胞识别、细胞粘附中的作用日益受到重视，成为当今研究的热点之一。多配体蛋白聚糖(Syndecans．1，SDC．1)属于粘附分子整合素跨膜粘连蛋白聚糖家族成员，通过其分子表面的硫酸肝素侧链可结合一系列配基，如细胞粘附分子、基质成分、生长因子、酶和酶抑制物等强1，以共受体方式调节细胞与微环境之间R重庆医科大学硕士研究生学位论文的相互作用，参与新生血管形成、炎

6、症反应的多个环节及白细胞与内皮细胞间的相互作用眇1等。近年来，其在血管内皮细胞中的作用逐渐得到了国内外学者的重视。因此，我们推测HSPG和SDC．1可以通过防止内皮细胞肿胀、脱落，抑制凝血及白细胞粘附，维持血管通透性等发挥一系列血管保护作用。本实验以大鼠心肌缺血再灌注损伤(ⅦⅪ)为模型，分析阿托伐他汀对大鼠心肌缺血再灌注损伤后HSPG和SDC．1的干预作用。1材料与方法1．1材料1．1．1动物来源：40只清洁级SD(SpmgueDawley，SD)雄性大鼠，体质量(220+20)g，由重庆医科大学实验动物

7、中心提供，合格证号：SCXK(渝)2007-0001。1．1．2主要试剂1．syndecan--1单克隆抗体美国SantaCruz2．HSPGELISA试剂盒3．SDC．1ELISA试剂盒4．DEPC5．免疫组化染色试剂盒SP．00236．琼脂糖7．Trizol8．Marker9．异丙醇10．阿托伐他汀11．HSPG多克隆抗体12．RT-PCR试剂盒13．氯仿美国R&D美国Sigma北京博奥森生北京瑞达恒辉北京志创常青上海欣百诺上海锦华大连辉瑞制药武汉博士德TaKaRa南京淮源1．1．3主要仪器设备1．电

8、子天平仪JA5003上海方瑞仪器有限公司9重庆医科大学硕士研究生学位论文2。小动物呼吸仪DW-30003．生物信号采集处理系统4．GelDoc凝胶成像分析系统5．PCR反应仪(PT-200)6．ELITE300电泳仪7．SIM．F140制冰机8．Olympus．BH2光学显微镜9．Olympus．C32AD一2显微摄像仪10．OlympusBX．41照相设备11．全波长酶标仪上海文乐生物科技有限公司上海欣软信息科技有限公司美国