原发瘤切除对荷人骨肉瘤裸鼠肺转移影响

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1、摘要目的：在构建荷人骨肉瘤裸鼠模型的基础上，观察原发瘤切除前后裸鼠体内血管生成水平的变化及其对骨肉瘤肺转移的影响，为研究伴发性肿瘤抵抗机制提供实验学基础。方法：采用骨肉瘤细胞悬液法构建荷人骨肉瘤裸小鼠模型。将0．2ml骨肉瘤细胞悬液(约2．0×106个细胞)注射至裸鼠左前肢皮下，接种两周后开始分组，左前肢皮下肿瘤作为原发瘤。l、原发瘤切除对裸鼠体内血管生成的影响。①原发瘤切除前后VEGF、内皮抑素的变化。空白组、对照组和实验组各20只，成瘤后第7天、第14天、第21天每组取5只处死抽血。第21天，实验组剩余5只行左前肢截肢术(

2、切除原发瘤)，对照组剩余5只行右前肢截肢术，空白组剩余5只不做处理，一周后全部处死抽血。用ELISA检测血清中内皮抑素和VEGF的浓度。②原发瘤切除前后裸鼠体内Matrigel胶体中血红蛋白浓度的变化。空白组、对照组和实验组各20只，成瘤后第7天、第14天、第21天每组取5只在腹部皮下注射Matrigel胶体0．5ml(含有bFGF200ng，肝素50u)，分别在注射一周后处死取出胶体。第21天，对照组与实验组剩余裸鼠行手术处理(手术同上)，并在腹部皮下注射Matrigel胶体，空白组仅注射胶体，一周后全部处死取出胶体。用Hi

3、CN法检测其中血红蛋白的浓度。2、原发瘤切除对骨肉瘤肺转移的影响。空白组、对照组和实验组各20只，接种肿瘤两周后，实验组行左前肢截肢术，对照组行右前肢截肢术，空白组不做手术处理，两周后处死裸鼠解剖观察有无肺部转移，如有肺转移则计数肺转移结节并分级。结果：1、空白组、对照组裸鼠第7、14、21、28天血清中内皮抑素、VEGF的浓度无明显差异；Matfigel小体中的血红蛋白浓度也无明显差异。术后，原发瘤切除组血清中内皮抑素、VEGF的浓度与未切除组(空白组、对照组)相比有明显的下降(内皮抑素为40．77±5．41ng／ml对12

4、3．18±5．94ng／ml、128．06±4．52ng／ml，P<0．01：VEGF为71．43±9．15pg／ml对115．81±4．38pg／ml、111．68±12．26pg／ml，P<0．01)；原发瘤切除组Matrigel小体中的血红蛋白浓度与未切除组相比有明显的升高(36．55±2．359／L对16．84±1．159／L、16．29±1．109／L，P<0．01)。2、原发瘤切除组的肺转移率与未切除组相比有明显提高(80％对40％、35％，P<0．05)。Ⅱ摘要结论：1、荷人骨肉瘤裸鼠原发瘤切除后，循环中的内皮抑

5、素与VEGF水平都有明显下降，且内皮抑素的下降幅度与VEGF相比更大，循环中ⅦGF／内皮抑素的相对比例升高，激活全身血管生成系统，使得肿瘤新生血管速度加快。2、荷人骨肉瘤裸鼠原发瘤切除后，骨肉瘤的肺转移速度明显加快。关键词：骨肉瘤；肺转移；伴发性肿瘤抵抗；内皮抑素；血管内皮生长因子IIlAbstractABSTRACTObjective：Toobservethechangesofan#ogenesisbeforeandafterexcisionofprimarytumoronthenudemicebearingosteosar

6、coma,andtostudytheeffectsonpulmonarymetastasis，providingtheexperimentalbasisforthemechanismofconcomitanttumorresistance(erR)．Methods：Themodelsofnudemicebearingosteosarcomawereconstructedbycellsuspension．Theleftanteriorflankofeachnudemousewassubcutaneouslyinjectedby0

7、．2mlosteosarcomacellsuspension(2．0X106cells)．Allthesubjectsweregroupedafter2weeks．TheosteosarcomaformedintheleftanteriorflankWasregardedastheprimarytumor．1．Effectsofprimarytumorexcisionontheangiogenesisinnudemice．①ThechangesofVEGFandESbeforeandafterexcisionofprimary

8、tumor．Thenormalgroup(20mice)，thecontrolgroup(20mice)andthetestgroup(20mice)wereinvolved．Each5micefrom3groupswerekilledandbloodcollectedont