功能性电刺激对急性脑梗死大鼠运动功能影响及其脑可塑性分子机制的研究

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1、中山大学博士学位论文功能性电刺激对急性脑梗死大鼠运动功能的影响及其脑可塑性的分子机制研究姓名：金冬梅申请学位级别：博士专业：康复医学与理疗学指导教师：燕铁斌20090525功能性电刺激对急性脑梗死人鼠运动功能的影响及其脑可塑性的分子机制研究功能性电刺激对急性脑梗死大鼠运动功能的影响及其脑可塑性的分子机制研究申请人：金冬梅导师：燕铁斌教授专业：康复医学与理疗学中文摘要前言脑卒中是神经系统的常见病及多发病，脑卒中后会遗留多种功能障碍，其中以运动功能障碍最为多见，极大地影响了患者日常生活活动能力和生活质量，给家庭和社会带来了沉重负担，因此脑卒中的治疗一直是

2、临床与基础研究的热点。功能性电刺激(FunctionalElectricalStimulation，FES)治疗作为电刺激治疗的一种，从20世纪60年代开始用于治疗脑卒中慢性期患者，近年来开始应用于急性期，据报道可以改善脑卒中患者的运动功能。我们在临床工作中也发现FES治疗可促进脑卒中急性期患者运动功能的恢复，但有关FES促进功能恢复机制的相关报道很少。成年大脑功能仍具有环境适应性、可塑性，在自然恢复过程中或外界的环境刺激和功能训练等情况下，脑皮质损伤后的大脑结构和功能会发生一系列改变，如树突和树突棘的分叉和增牛、突触的形成或退化、突触联系效能的增加

3、、轴突牛长路径的改变、多种神经递质的调整以及新生神经元分化等等。因此本研究应用FES治疗急性脑梗死大鼠，观察大鼠的运动功能改变情况，并进一步观察大鼠脑梗纯灶周围缺血半影区和对侧镜区脑的可塑性变化，以探讨FES治疗的可能机制，为临床应用提供理论依据。功能性电刺激对急性脑梗死人鼠运动功能的影响及其脑可塑性的分子机制研究目的1．观察FES治疗对急性脑梗死大鼠运动功能的影响。2．观察FES治疗对急性脑梗死大鼠脑缺血半影区和镜区突触素(Syp)、神经颗粒素州g)、神经丝蛋白(NF200)、微管相关蛋白-2(MAP一2)表达的影响。方法采用Longa线栓法制作大

4、脑中动脉栓塞(MCA0)模型，MCAo造模步骤结束后，在大鼠偏瘫侧上肢埋置金属导线，并经颅顶穿出。假手术组不在动脉内插鱼线栓塞。术后3d进行改良Bederson评分，评分为2分和3分的入组本实验。将大鼠随机分为三组：假手术组、安慰电刺激组和FES治疗组，每组又分为Od、3d、7d、14d四个亚组，每亚组6只。FES治疗使大鼠偏瘫上肢产牛伸腕和伸指动作。术后3d开始治疗，每天1次，每次10min，0d、3d、7d、14d组分别为治疗前、治疗3d、7d和14d。安慰电刺激组连接电极，但不给予电流刺激，假手术组不给予任何处理。分别在FES治疗前以及治疗后3

5、d、7d、14d给予平衡木行走测评、转棒上行走测评和网屏实验三种功能评定以观察各组的运动功能变化；应用Western—blot技术检测Syp、NF200蛋白表达，用免疫组化技术观察Ng蛋白表达，免疫组化和RT-PCR检测观察MAP．2蛋白和基因表达。应用SPSS13．0统计软件进行统计分析。各组结果以i±S表示，3组组内之间以及各组不同时问点组间的比较均采用单因素方差分析。设P(0．05表示差异有统计学意义。结果1．运动功能(1)平衡木行走测评：与假手术组大鼠比较，FES治疗组和安慰电刺激组大鼠均表现出运动功能损害(尸<0．05)。安慰电刺激组在14

6、d后运动功能较之前的各时间点明显改善(尸<0．05)；FES治疗组在治疗7d和14d后运动功能较之前的各时间点明显改善(P0．05)。功能性电刺激对急性脑梗死大鼠运动功能的影响及其脑可塑性的分子机制研究(2)转棒行走测评：与假手术组大鼠比较，FES治疗组和安慰刺激组大鼠均有运动功能损害(p，o．05)。安慰电刺激组在治疗14d后运动功能较之前的各时问点明显改善(尸<0．05)；FES治疗组在治疗7d和14d后运动功能较之前的各时间点明显改善(p，

7、o．05)。治疗7d和14d后，FES治疗组较安慰电刺激组评分有下降趋势，但差异无显著性意义(P>O．05)。(3)网屏试验评分：与假手术组大鼠比较，FES治疗组和安慰刺激组大鼠均有运动功能损害(尸

8、疗7d和14d后Syp蛋白表达水平明显增高(P