tgf-β1诱导分化rbmscs复合plla%5cβ-tcp多孔支架材料体外构建人工软骨实验的研究

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1、广州医学院硕士学位论文TGF-β1诱导分化的rBMSCs复合PLLAβ-TCP多孔支架材料体外构建人工软骨实验研究ExperimentalstudyofcomplexofrBMSCsinducedbyTGF-β1withPLLAβ-TCPtoconstructingtissueengineeringcartilageinvitro学科专业：外科学骨科研究方向：创伤骨科、运动医学硕士研究生：陈康指导老师：王大平教授广州医学院·广州2012年5月目录中英对照…………………………………………………......…………..1中

2、文摘要………………………………………………………..………..2英文摘要……………………………………………..…………………..5前言………………………………………………………..……….8材料……….……………………………………………...………...12方法……………………………………………….………………..19结果……………………………………………….………………..28讨论..……………………………………………….………………32全文总结……………………………………………….………………..37参考文献……………

3、………………………………….……………….38综述……………………………………………….……………….43致谢……………………………………………….……………......50发表论著………………………………………………………………….51原创性声明……………………………………………………...............52广州医学院硕士学位论文中英对照中英文名词对照与缩写缩写英文全名中文名称PLLApoly-1actide-co-glycolicacid左旋聚乳酸β-TCPβ-tricalciumphosphateβ-磷酸三

4、钙Col2A1typeIIcollagenII型胶原蛋白SEMscanelectronicmicroscope扫描电子显微镜GAGglycosaminoglycan糖胺聚糖TGF-β1transforminggrowthfactorbeta1转化生长因子β-1TBStoluidinebluestaining甲苯胺蓝染色PAGEpolyacrylamidegelelectrophoresis聚丙烯酰胺凝胶电泳Bpbasepair碱基对PCRpolymerasechainreaction多聚酶链反应RT-PCRreverset

5、ranscriptionpolymerase逆转录多聚酶链反应chainreactionKDkilo-dalton千道尔顿rBMSCsrabbitbonemesenchymalstemcells兔骨髓间充质干细胞PBSphosphatebuffer磷酸缓冲液SDSlaurylsodiumsulfate十二烷基硫酸钠DABdiarninobenzidine二氨基联苯胺mRNAmessengerribonucleicacid信使核糖核酸WBwesternblot蛋白印迹法ddH2Odoubledistilledwater双蒸水

6、EDTAethylenediaminetetroacetate乙二胺四乙酸钠FBSfetalbavineserum胎牛血清DMSOdimethylsulfoxide二甲基亚砜DMEMdulbecco'smodifiedeaglemedium细胞培养基1广州医学院硕士学位论文中文摘要TGF-β1诱导分化的rBMSCs复合PLLAβ-TCP多孔支架材料体外构建人工软骨实验研究硕士研究生：陈康导师：王大平教授中文摘要【目的】迄今为止，关节软骨缺损修复仍未得到很好的解决；临床修复手段大多近期疗效理想，长期疗效不确切或者有恶化的倾

7、向。运用组织工程技术制备的仿生人工软骨给治愈软骨损伤带来了希望，但当前大多存在种子细胞来源有限、供区受损，支架材料力学强度不够、生物兼容性及降解率欠佳等缺点；寻找对供区无损害且来源广泛的种子细胞，满足一定强度要求、操作相对简单、效果理想的组织工程化软骨正成为目前急需解决的重要问题。本实验将体外培养的第三代兔BMSCs经TGF-β1诱导向软骨细胞分化后种植到PLLAβ-TCP复合多孔支架材料，观察细胞在支架材料中的粘附、增殖及成软骨情况，为构建组织工程软骨修复软骨损伤以达到治愈目的奠定实验基础。【方法】1.取2～3月龄一健

8、康新西兰大白兔，体重2.0-3.0kg，无菌条件下用18号骨髓穿刺针从股骨外髁穿刺抽取骨髓3～5mL，应用Percoll(1.073g/ml)分离液分离培养骨髓中兔骨髓间充质干细胞，培养、传代至第三代，留备下一步实验。2.将上述第三代rBMSCs细胞，采用含TGF-β1成软骨细胞特殊诱导系统培养基培养1