人骨髓基质细胞软骨诱导分化及其与细胞载体体外复合

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1、第18卷第3期汕头大学医学院学报Vol.18No.32005JournalofShantouUniversityMedicalCollege2005人骨髓基质细胞软骨诱导分化及其与细胞载体体外复合胡军1），张爱斌1），陈永松1），杨佩璇1），宋建新1），刘晓岚2）（1汕头大学医学院第一附属医院骨科，广东汕头515041；2第一人民医院脊柱外科，湖南郴州423000）［摘要］目的：观察出生后人骨髓基质细胞（hBMSCs）在体外培养条件下增殖与分化的特点，探讨其向成软骨方向分化及机制。研究诱导细胞体外与PDLLA/

2、壳聚糖多孔材料复合。方法：密度梯度离心法进行hBMSCs体外培养。应用传五代细胞，经化学限定培养基诱导细胞，设实验对照组。采用倒置显微镜观察细胞增殖及形态变化，甲苯胺蓝染色观察诱导细胞合成细胞外基质中的蛋白多糖，RT-PCR检测Ⅱ型胶原mRNA的表达。将诱导的细胞分别与多孔羟基磷灰石、PDLLA/壳聚糖多孔材料复合，应用扫描电镜观察其在细胞载体表面的生长情况。结果：传五代hBMSCs经化学限定培养基诱导后转化成圆形肥大细胞，甲苯胺蓝染色阳性，Ⅱ型胶原mRNA表达与对照组比较有统计学意义。扫描电镜发现hBMSCs

3、在PDLLA/壳聚糖多孔材料表面增殖良好并分泌大量细胞基质。结论：体外培养hBMSCs经化学限定培养基诱导后可向成软骨方向分化，可作为软骨组织工程种子细胞。PDLLA/壳聚糖多孔复合材料是组织工程良好的细胞载体，有利于细胞的黏附与增殖。［关键词］人骨髓基质细胞；成软骨分化；组织工程；细胞培养［中图分类号］Q813.11；R318.1［文献标识码］A［文章编号］1007-471（62005）03-0135-04TheHumanBoneMarrowStromalCellsDifferentiateintoChond

4、roblastandCultureonPDLLA/ChitosanandHydroxyapatiteScaffoldinvitroHUJun1，ZHANGAi-bin1，CHENYong-song1，YANGPei-xuan1，SONGJian-xin1，LIUXiao-lan2（1DepartmentofOrthopaedics，TheFirstAffiliatedHospital，ShantouUniversityMedicalCollege，Shantou515041，China；2Departmento

5、fSpineSurgery，TheFirstPeople'sHospital，Chenzhou423000，China）［Abstract］Objective：Toexaminethepropertyandproliferationabilityofprimaryculturehumanbonemarrowstromalcell（shBMSCs），andtoinvestigatetheeffectofhBMSCsdifferentiationintochondroblast.Experimentonthepos

6、sibilityofPDLLA/chitosanporousmaterialaschondroblastmatrixscaffold，steptorevealtheroleforPDLLA/chitosan.Meth-ods：hBMSCsweresourceofthebonemarrowcollectedfromhealthyhumandonorsandculturedaccordingtoMajumdar’smethodinvitro，thecellsoffifthsubculturewerecultured

7、bychemicaldefinitionmedium，examinedbyinvertmicro-scope.ToluidinebluestainandRT-PCRwereusedtotestthetypeⅡcollagenmRNA.ToimplanthBMSCsoffifthgenerationonPDLLA/chitosanandHAwasobservedbyscanningelectronmicroscope.Results：ThehBMSCscouldbedifferentiatedintochondr

8、oblast，andRT-PCRshowedtheycouldsynthesistypeⅡcollagen.Scanningelectronmicro-scopeshowedthecellsproliferatedquicklyinPDLLA/chitosanscaffold.Conclusion：hBMSCscankeepproliferationanddifferentiation