hnf4α在肝细胞肝癌中调控wnt信号通路诱发上皮—间质转化过程分子机制

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1、厦门大学学位论文著作权使用声明lIIIIIIIIIHllIllllllIIII嘲01775本人同意厦门大学根据《中华人民共和国学位条例暂行实施办法》等规定保留和使用此学位论文，并向主管部门或其指定机构送交学位论文(包括纸质版和电子版)，允许学位论文进入厦门大学图书馆及其数据库被查阅、借阅。本人同意厦门大学将学位论文加入全国博士、硕士学位论文共建单位数据库进行检索，将学位论文的标题和摘要汇编出版，采用影印、缩印或者其它方式合理复制学位论文。本学位论文属于：()1．经厦门大学保密委员会审查核定的保密学位论文，于年月日解密，解

2、密后适用上述授权。(√)2·不保密，适用上述授权。(请在以上相应括号内打“√”或填上相应内容。保密学位论文应是已经厦门大学保密委员会审定过的学位论文，未经厦门大学保密委员会审定的学位论文均为公开学位论文。此声明栏不填写的，默认为公开学位论文，均适用上述授权。)声明人(签名)：摊山哆年石月占日。目录摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．1Abstract⋯⋯⋯．．⋯⋯⋯．⋯⋯．⋯⋯．⋯⋯．⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯．．．⋯⋯⋯⋯．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2第一章前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯41．1肝细胞核因子HNF4a⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯41．1．1肝细胞核因子HNF4a概述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．41．1．2肝细胞核因子HNF4a的功能⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．51．1．3肝细胞核因子HNF4a与肝脏肿瘤⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一61．2Wnt信号通路⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯71．2．1Wnt信号通路概述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．71．2．2Wnt信号通路的分类⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．81

4、．2．3经典Wnt信号通路⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯91．2．4[I-catenin的生物学功能⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯101．2．5TCF在Wnt信号通路的重要作用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．1l1．2．6Wnt信号通路与肿瘤⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯111．2．7Wnt信号通路与EMT⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．121．3上皮细胞间质转化EMT⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯121．3．1EMT概述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1

5、21．3．2EMT的特征⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．131．3．2．1E．钙粘蛋白(E．cadherin)的减少或缺失⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯131．3．2．2ZO．1的丢失和重定位⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯131．3．2．3上调某些蛋白质的表达⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯141．3．2．4EMT与胞外基质的关系⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯141．3．3EMT的诱导和调控⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．151．3．3．1生长因子对EMT的诱导⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．151．3．3．2TG

6、F．B信号通路对EMT的调控⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．151．3．3．3参与调控EMT的其他信号通路⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．16目录1．3．3。4转录因子对EMT的调控⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．161．3．3．5MicroRNA对EMT的调控⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯171．3．4EMT与肿瘤⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．17第二章材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．182．1常用的药品试剂与实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯182．2基因相关实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯

7、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯182．2．1大肠杆菌感受态细胞的制备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．182．2．2质粒DNA的转化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯192．2．3质粒小提(Tiangen小提中量试剂盒)⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯202．2．4质粒大提(康为世纪大提试剂盒)⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一212．2．5DNA样品琼脂糖凝胶电泳⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．212．2．6琼脂糖胶回收DNA片段(Omega试剂盒)⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．222．2．7pBoBi．puro．H】虾4Ⅸ重组质粒的

8、构建⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．232．2．7．1PCR扩增HNF4acDNA序列⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．232．2．7．2DNA的限制性内切酶消化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯242．2．7．3DNA片段与载体的连接反应⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯242．2．7．4菌落PCR⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯