丙酮醛对乳腺癌mda-mb-231细胞生物学功能的影响与其机制-研究

《丙酮醛对乳腺癌mda-mb-231细胞生物学功能的影响与其机制-研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、万方数据温州医科大学硕士学位论文丙酮醛对乳腺癌MDA．MB．231细胞生物学功能的影响及其机制研究摘要目的：有研究表明，丙酮醛在多种类型肿瘤中表达明显减低，并对肿瘤细胞具有抑制作用。为了探讨丙酮醛在乳腺癌中的作用，本研究拟通过体外实验，观察乳腺癌MDA．MB．231细胞经丙酮醛处理后，细胞的某些生物学功能包括增殖、凋亡、迁移、侵袭等所产生的变化，并探讨其中可能存在的分子生物学机制，希望能为体内实验和乳腺癌的临床治疗研究提供一些参考依据。方法：(1)采用CCK．8方法检测丙酮醛对细胞活性的影响：(2)采用平板克隆形成实验检测丙酮醛对乳腺癌细胞增殖能力的影响：(3)

2、采用Caspase．3活性检测实验检测丙酮醛对乳腺癌细胞凋亡能力的影响；(4)采用小管形成实验检测丙酮醛对乳腺癌细胞血管生成活性的影响；(5)乳腺癌细胞迁移能力是通过划痕修复实验与Transwell迁移实验来反映，而丙酮醛作用后细胞侵袭能力的改变由Transwell侵袭实验(铺基质胶)来检测；(6)Westernblot检测磷酸化AMPK(p-AMPK)、MMP．9、Bel．2等蛋白表达的变化。结果：(1)高浓度丙酮醛对乳腺癌细胞活性具有明显抑制作用，且该抑制作用具有浓度和时间依赖性；(2)加入不同浓度丙酮醛后细胞克隆形成与增殖能力均受到抑制；(3)与正常对照组

3、相比，丙酮醛处理后细胞凋亡增多；(4)丙酮醛可显著抑制乳腺癌细胞的血管生成活性；(5)丙酮醛对乳腺癌细胞迁移和侵袭能力具有明显的抑制作用：(6)加入丙酮醛后，细胞中P．AMPK、MMP．9、Bcl．2等蛋白的表达均降低：(7)丙酮醛的上述作用均可被其清除剂氨基胍逆转。结论：我们的研究结果显示，加入丙酮醛后，乳腺癌MDA．MB．23l细胞的增殖能3万方数据温州医科大学硕士学位论文力下降，血管生成活性，迁移和侵袭能力均明显减弱，而细胞凋亡有所增加。丙酮醛的这些作用可能与其下调p-AMPK、MMP-9、Bcl-2蛋白表达有关。本研究结果可为乳腺癌的治疗提供一个潜在的治

4、疗途径。关键词：丙酮醛；乳腺癌MDA．MB-231细胞；AMP依赖性蛋白激酶；侵袭4万方数据温州医科大学硕士学位论文BiologicalEffectsofMethylgly70xalonBreastCancerMDA-MB-231CellsandtheUnderlyingMechanismsABSTRACTobjectivesStudieshaveshownthatthemethylglyoxal(MG)isreducedincertaintypesoftumor,andithasinhibitoryeffectonawidevarietyoftumorcell

5、s．LittleiSknownabouttheeffectsofMGonhumanbreasteal'lCer．ThisstudyaimedtoinvestigatetheinvitrobiologicaleffectsofMGonhumanbreastcancerMDA．M咀．23lcellsandtheunderlyingmechanisms．Methods(1)CCK-8assaywascarriedouttodeterminetheconcentrationandtimeofMG，andthentotestthetumorcellsviability；(

6、2)CellproliferationWasanalysedusingplatecolonyformationassayafteraddingmethylglyoxal；(3)Caspase一3activityassayWasperformedtoanalyzetheapoptosisofMDA-MB一231cells；(4)Tubeformationassaywasappliedtoinvestigatethecellsangiogenicactivity；(5)Cellmigrationandinvasionweretestedusingwoundheali

7、ngassayandtranswellassay,respectively；(6)WesternblotWasperformedtodeterminetheP-AMPK，MMP-9，Bcl·2proteinexpressions．Results(1)CellviabilitywasextremelyreducedbyMGinadose-andtime-dependentmanner；(2)ColonyformationandcellproliferationwererestrainedbyadditionofMGatvariousconcentrations；(

8、3)Increaseda