围产期孕妇b组链球菌检测临床意义

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1、围产期孕妇B组链球菌检测临床意义【中图分类号】R71【文献标识码】A【文章编号】1004-7484(2013)09-0711-02B族链球菌(groupBstreptococci,CBS)是一种革兰阳性球菌，常定植于人下生殖道及胃肠道，也可定植于婴幼儿上呼吸道[1-2]o20世纪60年代首次发现其可导致严重的新生儿感染，随后进行了大量的研究，发现B族链球菌在围产期感染中是第一位的致病菌，可导致围产儿死亡。同时也是孕产妇生殖道感染的重要致病菌，可以导致泌尿系统感染、羊膜绒毛膜炎、产褥感染、孕产妇败血症和早产[3-6]o1996年美国疾病控制和预防中心(CentersforDisea

2、seControlandPrevention,CDC)联合其他专业机构，制定了“围产期B族链球菌疾病预防指南”，于2002年进行了一次较大的修改，并在2010年11月更新了指南。经过10年多的实践，新生儿GBS感染率下降了约80%[7]o长期以来我国对B族链球菌感染现状不够重视，直至近期，国内报道了一些B族链球菌感染导致新生儿死亡的病例，且研究提示,新生儿肺炎死亡病例中，B族链球菌是第一位的致病菌[8-9]o因此，本研究旨在比较不同方法检测B族链球菌阳性的准确性，了解妊娠晚期B族链球菌带菌状况及其对妊娠结局的影响。1材料与方法1.1研究对象收集2011年5月〜2012年12月在我

3、院妇产科住院和门诊进行B组链球菌检测的孕妇1100例，孕期为35〜37周，平均年龄26.5±14.2岁，其中高龄孕妇（235岁）109例。经产妇81例，初产妇910例。所有孕妇的孕周均经末次月经、早中孕期B超检查进行确认和核对。近期药物应用史，经孕妇知情同意，取材由临床医师规范采集阴道和直肠拭子2份，立即送检。1.2实验材料ToddHewrtt培养肉汤、哥伦比亚血琼脂、胎牛血清购于美国Gibco公司，rapidID32STAEP鉴定板条购于法国梅里埃公司，B组链球菌核酸检测试剂盒由中国泰普生物科技有限公司提供，实时荧光PCR仪购自是美国Stratagene公司。1.3方法1.3.

4、1标本采集：具体方法参照2002年CDC推荐的取材方法[10],取材时不需要使用阴道窥器，每例孕妇用两根拭子（阴道下1/3内分泌物，肛门括约肌上2〜3cm处直肠分泌物）同时取材，一份用于细菌培养，一份用于实时PCR技术检测。1.3.2GBS的分离细菌与培养鉴定：将采集的拭子及时送检实验室，首先在安全柜内将沾有分泌物拭子头剪下置于增菌ToddHewrtt肉汤中，37°C18〜24h后，分别接种于10%胎牛血清和哥伦比亚血琼脂平皿，5%C02环境、37°C18〜36h,挑取有B溶血环的细小菌落，经革兰染色镜检为阳性球菌,触酶试验阴性，进行rapidID32STAEP板条鉴定，若为B组

5、链球菌，再进行细菌药敏MIC实验。1.3.3GBS核酸的提取和实时荧光PCR检测：将取样后的拭子内加入lml清洗液(试剂盒内提供)，室温震荡5min,收集清洗拭子后的液体至1.5ml离心管，12000rpm/min离心3min,弃上清，加入清洗液lml,离心后弃上清，再取80u1清洗液重悬沉淀，加入固型DNA提取物0.lg,震荡5miri后,95°C2min,冰上5min,12000rpm/min离心5min,然后取上清进行PCR扩增。实时荧光PCR扩增程序参照说明书进行操作。1.3.4测序鉴定：扩增后PCR产物送上海生物工程股份有限公司进行测序分析。1.4统计学分析应用统计学软

6、件SPSS13.0对所有检测数据进行分析，计量资料以x±SD表示，计数资料进行X2检验，以P6h、初产妇产程延长、阴道检查次数＞6次、伴发子宫内膜炎及施行剖宫产时更易发生感染。在产科发热患者血培养所分离到的细菌中，GBS高达11%〜21%。GBS感染后的临床特点是发热出现早，平均产后llh即发热，伴有畏寒、心率快、腹胀、子宫复旧不良，宫旁或附件触痛。有报道在GBS(+)而行剖宫产的妇女中，产后子宫内膜炎发生率为61.1%,显著高于GBS(-)组，GBS(+)也与产后盆腔炎、蜂窝组织炎等相关，35%由GBS单独引起，65%与其他细菌混合感染[13]o在本研究中，GBS感染与否对孕妇

7、早产的影响没有统计学差异，但在导致新生儿获得性感染方面，GBS感染阳性组新生儿感染机率明显高于GBS检测阴性的。原因可能为：根据新生儿GBS感染发生的时间分为早发型、晚发型及复发型。早发型指出生后7d内发病，通常发生在出生后24h或72h内，以新生儿败血症为主，由宫内垂直感染所致;晚发型感染通常指出生7〜90d内的感染，可由产时垂直传播、院内感染或其他因素所致，90%为III型GBS,以肺炎、脑膜炎为主。有产科并发症的早产儿易受感染，发病率是足月儿的7倍，因脓毒血症死亡者高达90