腺病毒介导的神经生长因子基因治疗大鼠坐骨神经损伤的疗效研究

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1、腺病毒介导的神经生长因子基因治疗大鼠坐骨神经损伤的疗效研究陈渝，王大勇，王祖贵，范大礼，翁政（重庆市第九人民医院，重庆400700）摘要：目的观察腺病毒介导神经生长因子(Ad-NGF)基因治疗对大鼠坐骨神经损伤修复的疗效。方法取SD大鼠16只，切断右侧坐骨神经并缝合，随机分为Ad-NGF治疗组、神经生长因子(NGF)局部注射组、空腺病毒载体组和生理盐水(NS)局部注射组。术后第31天行坐骨神经功能指数及神经电生理测定，Westernblotting检测神经生长因子蛋白质表达水平。结果腺病毒介导神经生长因子较其余三组可显著增加

2、局部NGF蛋白质表达水平，改善坐骨神经功能指数和神经传导速度。结论腺病毒介导神经生长因子基因治疗可有效促进大鼠坐骨神经损伤后修复。关键词：坐骨神经；神经生长因子；神经损伤；腺病毒中图法分类号：R68文献标识码：AEffectofadenovirusexpressingnervegrowthfactoronsciaticnerveinjuryinratsCHENYu,WANGDa-yong,WANGZu-gui,FANDa-li,WENGZheng(DepartmentofOrthopedics,ChongqingNinthP

3、eople’sHospital,Chongqing400700,China)Abstract:ObjectiveToinvestigatetheeffectofadenovirusexpressingnervegrowthfactor(Ad-NGF)onsciaticnerveinjuryinrats.MethodsSciaticnerveinjurymodelwasestablishedbytransectionofrightsciaticnervein16maleSDrats,andthenrandomlydivided

4、intofourgroups:Ad-NGFgroup,nervegrowthfactor(NGF)group,adenovirusvectorgroupandnormalsodiumgroup.Theeffectofvarioustreatmentsoninjuredsciaticnervewasevaluatedbyexaminingsciaticnervefunctionindex(SFI)andproteinexpressionofNGFbyWesternblotting,performingelectrophysio

5、logicaltestonday31afteroperation.ResultsAd-NGFincreasedtheproteinexpressionofNGFandimprovedSFIandnerveconductionvelocitysignificantly,ascomparedwiththeotherthreegroups.ConclusionAd-NGFcaneffectivelypromotetherepairofsciaticnerveinjuryinrats.Keywords:sciaticnerve;ne

6、rvegrowthfactor;nerveinjury;adenovirus周围神经完全损伤后，所属感觉、运动和营养作用丧失，对肢体功能影响很大，若不修复神经，肢体功能不易恢复。神经生长因子（nervegrowthfactor,NGF）作为NGF家族第一个被发现的成员，大量研究已经证明其具有促进中枢及外周神经系统中神经元的存活、分化、促进损伤神经的轴突再生、防止细胞坏死的功能[1]。但局部神经、肌肉注射等给药方法常导致NGF浓度波动大，影响了NGF的临床疗效。本研究拟采用自行构建携带神经生长因子基因序列的5型腺病毒(aden

7、ovirusexpressingnervegrowthfactor,Ad-NGF)局部注射，观察Ad-NGF基因治疗对周围神经损伤的修复作用，探讨基因治疗在周围神经损伤中的应用。1材料与方法作者简介：陈渝.男，重庆北碚区人，硕士，主治医师，主要从事脊柱及周围神经损伤的研究。电话：（023）60750680，E-mail:chenyu@vip.163.com通信作者：王大勇，电话：（023）68280055，E-mail:cqcy3@sina.com收稿日期：2008-01-02；修回日期：2008-04-071.1材料与试剂

8、人结肠癌细胞株HT-29由重庆医科大学病理生理研究室提供，5型腺病毒穿梭质粒pCA13及骨架质粒pBHGE3为加拿大MicrobixBiosystems公司产品。Lipofectamine2000为Invitrogen公司产品。内切酶EcoRI及XbaI购自宝生物工程(大连)有限公司。两端