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时间:2018-07-08
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1、黄芪多糖对大鼠损伤坐骨神经再生的作用研究论文桑秋凌,魏壮,许则民,刘飙,刘浩宇,李满,尹维田【摘要】目的观察黄芪多糖(APS-P)对大鼠坐骨神经损伤后神经再生的影响。方法建立大鼠坐骨神经损伤模型,将雌性NCV),numbersofmyelinatednerveepointsthanthoseofcontrolgroup(P0.05).ConclusionAstragaluspolysaccharideshaseffectofpromotingregenerationofinjuriedperipheralnerve.Keyg/kg腹腔注射麻醉,分别在
2、大鼠左、右两侧股外侧肌间隙进入显露双侧坐骨神经,在坐骨结节下1.0cm处切断神经干,取同种异体鼠腹主动脉桥接坐骨神经,神经远近端之间留有2.0mm间隙,以9-0显微缝线制成小间隙桥接双侧坐骨神经损伤模型。术后第1天开始用药,实验组给予腹腔注射黄芪多糖20mg/kg,对照组给予同体积生理盐水。1次/d连续给药28d。1.3检测项目与检测方法在4,8,12周时分别观察大白鼠的下列指标。1.3.1一般情况攻击性、步态、足趾与足跟溃疡的发生、发展以及恢复情况、肌肉的萎缩与恢复情况、局部感染和死亡情况。1.3.2神经电生理检测利用MedtronicKeypoi
3、nt肌电图仪,实验动物双侧坐骨神经均作检测。方法:1%氯胺酮腹腔麻醉动物后,无菌消毒术野,俯卧位分别暴露坐骨神经总干,采用同芯针电极刺入大鼠比目鱼肌肌腹内作为记录电极,以平行刺激电极分别于吻合口近侧坐骨结节水平及远侧坐骨神经分支处给以超强刺激(电流为50mA),通过潜伏期差仪器自动计算出运动神经传导速度(MCV)。室温保持24℃。1.3.3组织学观察各组动物切取吻合口远端神经,经固定脱水包埋后分别作切片HE染色,光镜观察非神经细胞、无髓和有髓神经轴突在神经再生过程中的变化。通过HPIAS-1000高清晰度彩色病理图文分析系统。1.3.4透射电镜观察取
4、吻合口远端3mm神经按电镜标本常规固定、脱水、包埋后作超薄切片。FEI公司生产(飞利浦公司)的TEAIG2透射电子显微镜观察再生神经的超微结构。1.3.5统计学分析采用两组独立样本的t检验分析比较,结果以±s表示,P0.05统计学差异显著。2结果2.1大体观察术后两组动物均有后肢肿胀,步态不稳,体毛稀疏光泽变差,足趾溃疡,足趾脱落改变。但实验组鼠一般状态、攻击性较对照组恢复快。足趾溃疡和脱落数目实验组(3鼠4侧)要少于对照组(5鼠7侧)。取材时见两组动物神经吻合口均愈合良好,无神经瘤形成,实验组神经表面血管较丰富,神经与周围组织轻度黏连。见图1。2.
5、2肌电图检测结果运动神经传导速度(MNCV,m/s)4周时实验组为(28.95±5.30)m/s,对照组为(15.35±5.78)m/s,t值2.896,P0.05;8周时实验组为(40.20±6.23)m/s,对照组为(25.95±4.34)m/s,t值2.830,P0.05;12周时实验组为(49.63±8.61)m/s,对照组为(36.90±4.721)m/s,t值2.752,P0.05,统计学差异显著。2.3组织学检测结果光镜下术后12周纵切片(40×)可见实验组(图2)有髓神经纤维较多,排列规则;对照组(图3)有髓神经纤维数量较少。图像分析
6、再生有髓神经纤维数目:术后8周、12周实验组[8周为(149.00±22.16),12周为(180.14±21.35)]优于对照组[8周为(111.86±22.41)12周为(159.57±20.72)]。P0.05,统计学差异显著。2.4电镜观察结果术后12周实验组(图4,6)髓鞘较厚,板层致密,明暗板清晰。对照组(图5,7)髓鞘较薄,扭曲变形明显,板层疏松,点状分离,成熟度欠佳。3讨论周围神经损伤后再生是一个涉及多因素的复杂过程。如何促进神经再生,提高神经损伤后的治疗效果,仍然是众多医者孜孜探索的重点。中药及其提取物来源广泛,价格低廉,临床应用历
7、史久远,作用机制多途径,有着不可轻视的作用。黄芪多糖(APS)作为黄芪的主要有效成分,对机体免疫功能有广泛的调节作用[1]。本次实验观察到其对周围神经损伤后再生有比较积极的影响。3.1黄芪多糖促进周围神经再生效果及作用机制本次实验首先从整体上将APS组和对照组的各项检测数据进行分析比较,结果显示APS组和对照组相比神经再生质量较好。然后通过对相应时间亚组在固定时间点上的两两比较,发现实验组动物4周时运动神经的传导功能即有较好的恢复。光镜和电镜观察到8周和12周时实验组神经髓鞘成熟度明显好于对照组,实验组神经髓鞘较厚,排列紧密,板层致密,间质增生较少。
8、虽然两组大鼠损伤的神经都有一定程度的再生,但再生的速度和质量有所不同。从功能学和形态学的角度可以说明实验组与
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