戊四氮致痫后大鼠海马中caspase3和hsp70的动态表达变化

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1、戊四氮致痫后大鼠海马中Caspase3和Hsp70的动态表达变化甄军丽,王维平,贾丽景,段瑞生,安立伟,李周平(河北医科大学第二医院神经内科,石家庄050000)摘要:目的 研究戊四氮(pentlenetrazol,PTZ)致癫痫发作后大鼠海马中caspase3和hsp70的动态变化,以便及时进行干预并控制凋亡的发生。方法 PTZ致痫急性发作后分别在3、6、12、24h,行免疫组化法计算阳性细胞的平均密度值;Nissle染色法检测神经细胞丢失坏死情况;电镜观察海马CA3区的超微结构,Western-blot方法分别检测海马组织中caspase3和hsp70的表达情况。

2、结果 致痫后caspase3和hsp70的表达趋势在各种方法中基本一致,即3h开始表达增高,6h后明显增高,24h时神经细胞表现典型的凋亡状态,明显高于对照组(P<0.05)。结论癫痫发作同时上调caspase3和hsp70的表达,可导致神经细胞发生凋亡,从而表明癫痫急性期诱导的细胞凋亡可能对脑组织在应激保护方面起了重要的角色。关键词:癫痫发作;凋亡;caspase3;hsp70;海马中图法分类号:R742.1;   文献标识码:ATheexpessionchangesofcaspase3andhsp70inhippocampofratsafterPTZ-induce

3、dseizureZHENJun-li,WANGWei-ping,JIALi-jing,etal.(DepartmentOfNeurology,theSecondHospital,HebeiMedicalUniversity,Shijiazhuang050000,China.  Abstract:Objective Toinvestigatthedynamicstatechangesofcaspases3andhsp70inhippocampofratsafterseizuresothatwecanadoptinterventionandcontrolneurocyte

4、apoptosisintime.MethodsAt3,6,12,and24hafterseizure,theaveragedensityofpositivecellwascountedwithimmunohistochemistry.ThesituationofneurocytelossornecrosiswasdeterminedwithNisslestainingandUltramicrostructureofhippocampCA3wasobservedwithelectronmicroscopemethod,respectively.Expressionsof

5、caspase3andhsp70inhippocampofratsweredeterminedbymeansofWestern-blot.ResultsTherewasasimilartendencybetweencaspase3andhsp70ineachmethod.Therewassignificantlyhigherthanthatcontrolgroup(P<0.05).Namely,theybegaintoincreaseslightlyat3hafterseizureandat6hafterseizuresignificantly,thentheneur

6、ocytesshowatypicalapoptosisstateat24hseizure.Conclusion Seizurecouldupregulateexpressionofcaspase3andhsp70simultaneously,andleadtoneurocyteapoptosis.Thisresultdemonstratesthatneurocyteapoptosisatacutestageofseizuremightplayanimportantroleinstressdefendenceofbriantissue.Keywords:seizure;

7、apoptosis;caspases3;hsp70;hippocamp癫痫持续状态(statusepilepticus,SE)是临床上的急症,可导致持久的神经元损伤,降低病人的生活质量,并增加其后痫性发作的几率。既往有大量研究探讨SE后神经元损伤的机制,但迄今为止,仍有许多有关凋亡的问题尚不清晰。Caspase3是caspases家族的核心成员,在哺乳动物中caspase3通过水解相应的蛋白底物,介导了大多数细胞的凋亡。本实验通过PTZ制备SD大鼠急性癫痫模型,检测了癫痫急性发作后caspase3和hsp70的表达情况,以期初步探讨癫痫样放电致神经元

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