非基因组活性对雌激素受体阳性乳腺癌细胞herceptin敏感性的影响

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1、非基因组活性对雌激素受体阳性乳腺癌细胞Herceptin敏感性的影响姜晓梅，陈彬，王越，王杨，李渝萍，娄桂予，张艳，何凤田（400038重庆，第三军医大学生物化学与分子生物学教研室）[摘要]目的探讨雌激素（estrogen，E2）通过雌激素受体（estrogenreceptor，ER）非基因组活性干扰ER阳性（ER+）乳腺癌细胞对HER2（humanepidermalgrowthfactorreceptor2）的人源化单克隆抗体Herceptin的敏感性及其机制。方法采用Westernblot和瞬时转染结合荧光素酶报告基因分析，鉴定BT474乳腺癌细胞（ER+

2、/HER2+）和SKBR3乳腺癌细胞（ER-/HER2+）作为对比研究对象；在E2存在与否的情况下，采用细胞增殖分析比较了Heregulin（HRG）诱导的BT474和SKBR3细胞对Herceptin敏感性的改变；采用Westernblot检测了HER2途径下游关键分子MAPK的磷酸化水平。结果在没有E2存在的情况下，Herceptin可有效抑制BT474和SKBR3细胞的增殖(P＜0.01)；在E2存在的情况下，Herceptin对BT474细胞增殖的抑制效应消失(P＞0.01)，同时，Herceptin不能降低MAPK的磷酸化；这些现象在SKBR3乳腺癌

3、细胞中却不会出现。结论E2可通过ER非基因组活性影响ER+的乳腺癌细胞Herceptin的治疗效果，并可能参与了Herceptin抵抗的发生。[关键词]Herceptin；乳腺癌；抵抗；ER；非基因组活性[中图分类号][文献标识码]ATheeffectofestrogenreceptoronthesensitivityofHerceptininERpositivebreastcancerthroughitsnon-genomicactivityJianXiao-Mei，ChenBin，WangYue，WangYang，LiYuping，LouGuiyu，Zha

4、ngYan，HeFengtia（DepartmentofBiochemistryandMolecularBiology，ThirdMilitaryMedicalUniversity，Chongqing，400038，China）[Abstract]ObjectiveToexploretheeffectandmechanismofestrogenonthesensitivityofHerceptin，ahumanizedmonoclonalantibodydirectedagainsthumanepidermalgrowthfactorreceptor2（HER

5、2）inERpositivebreastcancerthroughestrogenreceptor（ER）non-genomicactivity.MethodsER-positive/HER2-positiveBT474andER-negative/HER2-positiveSKBR3breastcancercellswasindentifiedasacomparablemodelusingwesternblot，transienttransfectionandrepoterassay.Inthepresenceorobsenceofestrogen，thes

6、ensitivityofHerceptinoninhibitingHereguilin-inducedcellproliferationwasdetectedbycellproliferationassayandtheeffectofHerceptinonthelevelsofphosphorylationofMAPK，thekeymeleculesdownstreamofHer2pathwaywasobservedbyWesternblot.ResultsInobsenceofestrogen，HerceptineffectivelyinhibitsHere

7、guilin-inducedproliferationofBT474andSKBR3cells(P＜0.01).Inpresenceofestrogen，theinhibitoryeffectofherceptinonHereguilin-inducedBT474cellproliferationisdisappered(P＞0.01)andHerceptincouldnotinhibitHereguilin-inducedphosphorylationofMAPK.ThesechangescouldnotbeobservedinSKBR3cells.Conc

8、lusionsE2canaffectt