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1、男性避孕纳米粒的制备与体外实验研究徐萍萍，杨利华，魏桂芝，张建祥，东亚君，梁志清*摘要目的构建聚乳酸-羟乙酸共聚物(PLGA)包载促卵泡生成素受体表位肽(FSHR32-44)的纳米粒，探讨PLGA材料作为避孕疫苗载体的可行性。方法使用PLGA为载体,制备出包载促卵泡生成素受体的B细胞表位(FSHR32-44)的纳米粒，投射电镜（TEM）观察表观形态，粒径仪检测粒径分布范围和zeta电位，体外释放试检测其理化特性。激光共聚焦显微镜观察小鼠骨髓来源树突状细胞（BMDCs）吞噬FSHR可溶性多肽和FSHR/PLGANPs的能力，流式技术检测比较FSHR、PL
2、GANP和FSHR/PLGANP促BMDCs成熟能力。结果单乳-溶剂挥发法制备的FSHR/PLGANP，大小粒径分布均匀、表面规整,平均粒径分布（296.3±3.5nm）,zeta电位（-16.1±0.4mv），FSHR包封率（62.71±2.83%），并具有缓慢释放抗原的能力；体外细胞水平实验显示FSHR表位肽纳米粒易于被DCs摄取，有剂量和时间依赖能显著上调DCs表面CD40、CD86、CD83和MHC-Ⅱ功能分子的表达。结论PLGA包载FSHR多肽有良好的包封率；易于被DCs吞噬，并有强的促进DCs成熟作用；因此PLGA材料可以作为FSHR32-
3、44避孕疫苗的载体。基金项目：国家自然科学基金面上项目（81270731）作者单位：400038重庆，第三军医大学西南医院妇产科（徐萍萍，杨利华，魏桂芝东亚君，梁志清），第三军医大学药剂教研室（张建祥）；063000河北唐山，河北省唐山市工人医院。*通信作者：梁志清,E-mail:zhiq.lzliang@gmail.com关键词FSHR；PLGA；纳米疫苗；避孕中图分类号R169.41文献标识码APreparationofFSHR32-44malenanoparticlescontraceptiveandtheeffectsinvitro[Abstr
4、act]Tosynthesisencapsulatedfollicle-stimulatinghormonereceptorpeptide(FSHR32-44)NPsbypolylacticacid-glycolicacidcopolymer(PLGA)whichisthebio-degradablepolymermaterialapprovedbyFDA,researchwhetherPLGAmaterialissuitableasavectorforcontraceptivevaccine.EmulsionprocesswasusedforNPsp
5、reparation,andthenobservedthemorphologicalunderTEM;Melvinlaserpotentialparticlesizeinstrumentdetectedtheparticlesize,distribution,andzetapotential.Furtherstudiedthecharacterofreleasinginvitro,examinedthenanoparticlesup-takedbyBMDCsbylaserscanningconfoucalmicroscopeandthephenotyp
6、icchangesofDCscoculturewithvariousformulationFSHRNPbyflowcytometry.ResultsofthesestudiesshowthatFSHR/PLGANPshaduniformparticlesizedistribution,surfaceregularity,theaverageofparticlesize(296.3±3.5nm),zetapotential(-16.1±0.4mv),encapsulationefficiencyofFSHR(62.71±2.83%),totalrelea
7、serate(98.3%),andhadtheabilitytoslowlyreleasetheantigen.TheFSHRpeptideencapsuledPLGANPshadwell-encapsulatedefficiency,couldbeconvenientlyup-takedbyDCs,andpromotedstronglyinducingthematurationofDCs,so,PLGAmaterialcanbeusedasthevectorofpeptideFSHR.在现有的避孕措施中，可供男性选择的避孕方法有限；但最新调查显示男性
8、承担家庭生育计划的意愿却越来越强烈，这种意愿在发展中国家更加明显[1]。免疫性避孕疫苗具有经济
