肠杆菌科其他菌属的微生物学检验

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1、肠杆菌科其他菌属的微生物学检验孙来芬朱瑞敏(黑龙江省鹤岗市人民医院154101)【关键词】微生物检验肠杆菌【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】2095-1752(2013)34-0205-02肠杆菌科除上述主要对人致病的菌属外，还有克雷伯菌属、肠杆菌属、沙雷菌属等，为条件致病菌，在临床上感染性疾病中较常见。1克雷伯菌属克雷伯菌属主要包括肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌等，为条件致病菌，临床上感染性疾病中以肺炎克雷伯菌多见。肺炎克雷伯菌包括肺炎亚种、臭鼻亚种和鼻硬结亚种。1丄微牛物学检验：克雷伯菌检验程序可按肠杆菌科细菌进行检验。据不同疾病采集不同标木，如血液、痰、脓

2、汁、尿液、脑脊液、胸水和腹水等。取痰、脓汁、尿液、脑脊液、胸水、腹水标木，离心后将沉淀物涂片做革兰染色镜检,可见革兰阴性球杆菌，有明显的荚膜。血液标木或穿刺液标木接种于肉汤培养基增菌培养，其他标木接种于血平板和MAC平板。35°C孵育18〜24h,取血平板上灰白色大而黏稠的菌落和MAC上乳糖不发酵型黏液菌落，作进一步鉴定。菌落性状、形态染色特性符合克雷伯菌的特点，氧化酶阴性、硝酸盐还原阳性，在KIA试验斜面产酸、底层产酸产气、H2S阴性，MIU试验为+/—，V—P试验为阳性，可初步鉴定为克雷伯菌。然后可进一步进行牛化反应鉴定到种和亚种,并结合荚膜肿胀试验进行鉴别。1.2牛物

3、学性状：形态与染色：克雷伯菌为革兰阴性杆菌，卵圆形或球杆状，常成双排列，有菌毛；无芽胞，无鞭毛。有明显的荚膜，荚膜肿胀试验是木属菌与其他类似菌的主要鉴别方法；培养特性：克雷伯菌兼性厌氧，营养要求不高,在血平板上形成较大凸起、灰白色、不透明、不溶血、黏液型菌落，用接种环挑起时可出现拉丝现象。在肠道选择培养基上，可发酵乳糖产酸，形成较大的有色黏稠菌落。在液体培养基中呈混浊型生长，可见菌膜和黏性沉淀物。生化反应：克雷伯菌IMViC试验结果为一一++,腺酶、ONPG、丙二酸盐、黏质酸盐试验呈阳性。1.3临床意义克雷伯菌是医院感染中常见的条件致病菌，以肺炎克雷伯菌感染较多见。肺炎克雷

4、伯菌可引起典型的原发性肺炎，也可引起肺外感染，如肠炎、婴儿脑膜炎、菌血症、泌尿系统感染等。其中臭鼻亚种可引起臭鼻症和鼻黏膜化脓性感染。鼻便结亚种可引起呼吸道黏膜、口咽部、鼻和鼻窦等部位感染,导致肉芽肿病变和硬结形成。产酸克雷伯菌可引起人体各部位感染。2肠杆菌属肠杆菌属主要分布于自然界，偶见于人和动物肠道，为条件致病菌；临床上常见的有产气肠杆菌、阴沟肠杆菌和阪崎肠杆菌。2.1微生物学检验：肠杆菌的基本鉴定特征：镜检为革兰阴性粗短杆菌；氧化酶试验阴性，硝酸盐还原试验阳性；KIA试验斜面产酸、底层产酸产气、H2S阴性，MIU试验为+—一/+；鸟氨酸脱竣酶试验阳性。可根据更多生化反

5、应鉴定到属和种；鉴别要点：通过鸟氨酸脱竣酶试验和动力试验与肺炎克雷伯菌鉴别,肺炎克雷伯菌均为阴性，而肠杆菌则为阳性。通过IMViC试验与大肠埃希菌鉴别,大肠埃希菌为卄，肠杆菌则为卄。2.2生物学性状：形态与染色：肠杆菌为革兰阴性粗短杆菌，有周鞭毛，部分菌株有荚膜，无芽胞；培养特性：肠杆菌兼性厌氧，营养要求不高，在营养琼脂和血平板上形成大而湿润的黏液型菌落，在肠道选择培养基上为乳糖发酵型菌落，在液体培养基中可见菌膜和黏性沉淀物；生化反应：肠杆菌IMViC试验结果为一一++,鸟氨酸脱竣酶、精氨酸双水解酶试验阳性，赖氨酸脱竣酶试验阴性。2.3临床意义：肠杆菌广泛分布于自然界，为肠

6、道正常菌群，是医院感染常见的病原菌之一。临床上分离的肠杆菌中最常见的阴沟肠杆菌和产气肠杆菌，可引起尿路感染、呼吸道感染、伤口感染等肠道外感染。阪崎肠杆菌可引起新生儿脑膜炎和败血症，死亡率较高。3沙雷菌属沙雷菌属广泛分布于自然界，包括黏质沙雷菌等10余种。临床上感染性疾病中以黏质沙雷菌最为常见。3.1微生物学检验沙雷菌的特征是酯酶、明胶酶和DNA酶试验均呈阳性。利用更多的生化反应可鉴定到种。3.2生物学性状：形态与染色：沙雷菌为革兰阴性小杆菌，有周鞭毛，无芽胞，除气味沙雷菌有微荚膜，其余菌种无荚膜。黏质沙雷菌是最小的细菌，常用于检查滤菌器的除菌效果；培养特性：沙雷菌兼性厌氧，

7、营养要求不高，在营养琼脂上可形成不透明，白色、红色、粉红色大菌落。所产色索包括非水溶性灵红素和水溶性毗咯竣酸;生化反应:沙雷菌IMViC试验结果为一一++,发酵葡萄糖、蔗糖、甘露醇，不发酵乳糖，ONPG、DNA酶、酯酶、明胶酶、鸟氨酸脱竣酶、赖氨酸脱竣酶试验均阳性。3.3临床意义沙雷菌具有侵袭性和多重耐药性，已成为重要病原菌。黏质沙雷菌主要引起肠道外感染，与医院感染的暴发流行有关，可致肺炎、败血症、泌尿道感染、输血和外科感染。气味沙雷菌与医院感染败血症有关，普城沙雷菌可致社区感染。参考文献[1]翁连海主编，食品微生