正文描述:《反义rna抑制c-myc表达增强骨肉瘤细胞对顺铂的敏感性》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、反义RNA抑制c-myc表达增强骨肉瘤细胞对顺铂的敏感性李宏维1,叶凯山2,吴卓1,王拴科2(730000兰州,兰州大学第二医院骨科1;730000兰州,兰州大学第二医院骨关节疾病研究重点实验室2)[摘要]目的:通过对骨肉瘤细胞MG-63和U2OSc-myc基因干扰,初步探讨顺铂对c-myc低表达骨肉瘤细胞凋亡的影响。方法:以腺病毒为载体,构建表达反义c-myc的重组腺病毒(Ad-Asc-myc),并在体外感染骨肉瘤细胞MG-63和U2OS,与不同浓度及不同时间点的顺铂作用后,采用蛋白免疫印迹(Westernblot)方法检测干扰水平;瑞氏染色和MT
2、T检测顺铂对骨肉瘤细胞MG-63和U2OS凋亡作用。结果:构建包装的腺病毒Ad-Asc-myc体外感染MG-63和U2OS48h后,可明显降低c-myc蛋白表达;随着顺铂浓度和处理时间增加可增强对细胞增殖的抑制。结论:抑制c-myc的表达可以增强骨肉瘤对化疗的敏感性。[关键词]反义c-myc;骨肉瘤;顺铂;细胞凋亡[中图法分类号]R738.1;R363[文献标志码]AAntisenseRNAofc-mycgeneenhancessensitivityofosteosarcomacellstocisplatin-inducedapoptosisLiHo
3、ngwei1,YeKaishan2,WuZhuo1,WangShuanke2(1LanzhouUniversitySecondHospital,Departmentoforthopedics,Lanzhou,730000;2LanzhouUniversitySecondHospital,OrthopaedicskeyLaboratoryofGansuProvince,Lanzhou,730000,China)[Abstract]Objective:Toinvestigatewhetherdown-regulationofc-mycgenewithan
4、tisenseRNAcanincreasethesensitivityofosteosarcomacellsMG-63andU2OStocisplatin-inducedapoptosis.Methods:Therecombinantadenovirus(Ad-Asc-myc)encodingantisenseRNAtargetingc-mycwasconstructedandusedtotransfectosteosarcomacellsMG-63andU2OS.Theexpressionofc-mycgenewasanalyzedbyquanti
5、tativereal-timePCRandWesternblot.Thechangeofthesensitivitytocisplain-inducedapoptosiswasassayedbyMTTassay.TheshapeofosteosarcomacellswasobservedbyWright'sstaining.Results:Ad-Asc-mycdown-regulatedtheexpressionofc-mycgeneaftertransfectionofMG-63andU2OScellsfor48h,whichresultedina
6、nincreaseofcellproliferationinhibitioninducedbycisplatininadose-andtime-dependentmanner.Conclusion:Theinhibitionofc-mycgeneexpressionincreasesthechemotherapysensitivityofosteosarcoma.[Keywords]antisensec-myc;osteosarcoma;cisplatin;apoptosisSupportedbytheNaturalScienceFoundation
7、ofGansu(1208RJ2A272).LiHongweiisfirstauthorwhocontributestothearticle.Correspondingauthor:WangShuanke,,E-mail:lihw1227@gmail.com[基金项目]甘肃省科技厅自然科学基金计划(1208RJ2A272)[通信作者]王拴科,E-mail:lihw1227@gmail.com[优先出版]http://www.cnki.net/kcms/detail/51.1095.R.20141027.1551.001.html(2014-10-27)
8、Myc在所有细胞中都有一定表达,它调节多种与细胞增殖及周期相关的基因,在细胞的增殖分化以及凋亡中发挥重要作用
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