htr反义寡核苷酸对结直肠癌sw480细胞的凋亡及凋亡诱导因子表达的影响

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1、hTR反义寡核苷酸对结直肠癌SW480细胞的凋亡及凋亡诱导因子表达的影响李靓，李洋，王继见（400010重庆，重庆医科大学附属第二医院普外科）[摘要]目的探讨封闭人端粒酶RNA功能区的反义寡核苷酸(humantelomeraseRNAantisenseoligonucleotide，hTRASODN)对结直肠癌SW480细胞凋亡及凋亡诱导因子(apoptosisinducingfactor，AIF)表达的影响。方法通过脂质体将hTRASODN1次/d,连续3d转染入人结直肠癌SW480细胞，以未加ASODN的脂质体空白组及脂质体

2、转染的正义组为对照。荧光显微镜观察转染情况，流式细胞仪测定转染后SW480细胞的凋亡率，RT-PCR方法测定转染后AIF的表达情况。结果hTRASODN转染细胞后，倒置显微镜下观察各组细胞，细胞内有绿色荧光均匀分布表示转染良好。流式细胞仪测定转染24、48、72h后，各实验组凋亡率分别为：空白组（3.07±0.11）%、（3.71±0.63）%、（4.23±0.41）%，正义组（4.28±0.41）%、（4.49±0.56）%、（5.13±0.56）%），反义组（13.11±0.32）%、（22.04±0.21）%、（16.71

3、±0.82）%。反义组分别与空白组、正义组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；而正义组与空白组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。空白组、正义组、反义组PCR产量分别为（0.1527±0.0021）、（0.1580±0.0078）、（0.3683±0.0109）。反义组分别与空白组、正义组比较，差异有统计学意义（P<0.05）；正义组与空白组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。结论hTRASODN具有明显的促进凋亡，抗肿瘤作用。[关键词]hTR；反义寡核苷酸；结直肠癌；凋亡；AIFDetectionofcellapo

4、ptosis,andexpressionofapoptosisinducingfactorincoloncarcinomacellsSW480treatedwithhTRantisenseoligodeoxynucleotideLiliangLiYangWangJijian(400010Chongqing,ChongqingMedicalUniversity:Generalsugeryofthesecondhospital)[Abstract]ObjectiveToexploretheeffectsofthehumantelom

5、eraseRNA(hTR)antisenseoligodeoxynueleotide(ASODN)oncellapoptosis，andtheexpressionofapoptosisinducingfactor(AIF)ofhumamcoloncancerSW480ce11．MethodsBythemethodofliposometransfection，hTRantisenseoligodeoxynueleotidewastransfectedintohumancoloncancerSW480cell，whatonceada

6、yandcontacttransfectionthreedays,andthecontrastsarethegroudwithoutASODNandthesenseoligodeoxynueleotidebyliposometransfection.Observingcircumstancesoftransfectionbyfluorescencemicroscopy,determinationtheapoptosisofSW480cellaftertransfectionbyflowcytometry,anddetermina

7、tiontheexpressionofAIFaftertransfectionbyRT-PCR.ResultsAfterhTRantisenseoligodeoxynueleotidetransfectedintocells,observedeverygroupcellsbyinvertedmicroscope,it'sgoodtransfectionforwhichhadgreenfluorescentequallydistributedintocells.After24、48、72h,menruratedthetransfe

8、ctionbyflowcytometry,theapoptoticpercentageofeverygroupseparate:theblankgroup（3.07±0.11）%、（3.71±0.63）%、（4.23±0.41）%，thesensegroup（4