反义抑制survivin表达对槲皮素诱导肝癌ssmc-7721细胞凋亡的影响

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1、兰州人学硕士学位论文缩略词表英文缩写英文全称中文全称ASODNantisenseoligodeoxynucleotide反义寡核苷酸SODNsenseoligodeoxynucleotide正义寡核苷酸DMSODimethylsulfoxide二甲基囊砜FCMflowcytometry流式细胞术HCChepatocellularcarcinoma肝细胞肝癌MTrMethylThiazolylTetrazolium四甲基偶氮唑盐mRNAmessengerribonucleicacid信使核糖核酸SDSsodiumdodecylsulphate十二烷基硫酸钠SABCstreptavidin-bio

2、tin-enzyme—complet链霉亲和素．生物素。过氧化物酶复合物RT．PCRreversetranscriptionpolymerase逆转录聚合酶链式反应chainreactionPBSPhosphateBufferedSaline磷酸盐缓冲溶液DEPCDiethylPyrocarbonate焦磷酰二乙酯玉婶inhibitorofapoptosisproteins凋亡翔铡蛋自家族LipLipofectamineTM2000Reagent脂质体AlApoptosisIndex凋亡指数CaspaseCysteinyaspartatespecific半胱氨酸天冬氨酸特异性protease蛋

3、白酶BIRBaculovirusIAPrepeat杆状病毒凋亡抑制蛋自重复序列EBethidiumbromide溴化乙锭越ApoptosisIndex凋亡指数EPR．1Effectorcellproteasereceptor一1效应细胞蛋自酶受体．1兰州大学硕士学位论文原创性声明本人郑重声明：本人所呈交的学位论文，是在导师的指导下独立进行研究所取得的成果。学位论文中凡引用他人已经发表或未发表的成果、数据、观点等，均已注明出处。除文中已经注明引用的内容外，不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究成果做出重要贡献的个人和集体，均己在文中以明确方式表明。本声明的法律责任由本人

4、承担。论文作者签名：兰奎童兰鱼召期：型!兰：!：：圭z兰州大学硕士学位论文关于学位论文使用授权的声明本人在导师指导下所完成的论文及相关的职务作品，知识产权归属兰必l大学。本人完全了解兰州大学有关保存、使用学位论文的规定，同意学校保存或向国家有关部门或机构送交论文的纸质版和电子版，允许论文被查阏和借阅；本人授权兰州大学可以将本学位论文的部分或全部内容编入有关数据库进行检索，可以采用任何复制手段保存和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该论文直接相关的学术论文或成果时，第一署名单位仍然为兰州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。论文作者签名：墅曼握导师签名兰州大学硕+学位论文反义抑制Su

5、rvivin表达对槲皮素诱导肝癌SSMC．7721细胞凋亡的影响中文摘要目的：采用Survivin反义寡核昔酸(AntiscnseOligodeoxynucleotides，ASODN)复合物抑制Survivin表达，研究其对槲皮素诱导肝癌SSMC。7721细胞凋亡的影响。方法：体外培养人肝癌SSMC．7721细胞，取对数生长期细胞进行实验。实验分王、鼗两部分：I部分分为空自对照组(设平行组)、等量脂质体LipofectamincTM2。o。对照组、400nmol／LSODN复合物组、400nmoI／LASODN复合物组(设平行组)，转染48h；II部分弃掉王部分各组培养液，换新指定培养液，分

6、为空白对照组、40umol／L槲皮素组、脂质体LipofectamineTinooo量rd、SODN复合物组、ASODN复合物组、ASODN复合物+40umol／L槲皮素组(联合组)，孵育细胞24h后检测。I部分结束时采用RT-PCR、细胞免疫组化染色检测各组SSMC-7721细胞Survivin基因表达变化；Il部分结束时用吖啶橙(AcridineOrange，AO)染色法观察细胞凋亡时形态变化，四甲基偶氮唑蓝(M硼法检测SSMC．7721细胞生长抑制率，Annexi．VWl双染流式细胞仪检测SSMC-7721纲胞凋亡率，班单染流式细胞仪检测纲胞周期变化。结果：ASODN复合物作用肝癌SSM

7、C．7721细胞48h后能下调SurvivinmRNA及survivin蛋自的表达fP