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1、兔角膜缘干细胞的形态学研究*苏敏*基金项目:贵州省科技厅黔科合J字(2006)082号作者简介:苏敏(1971年—),通讯作者,女,贵州省遵义市(县)人,汉族,硕士,副教授,主要从事实验组织学方面的研究,发表论文9篇。电话:(0851)6908567,E-mail:summ30@163.com*基金项目:贵州省科技厅黔科合J字(2006)082号郑琳许庭良李红胡蓉黄悦(贵阳医学院组织学与胚胎学教研室,(贵州贵阳550004)摘要:目的探讨兔角膜缘干细胞(LimbalStemCells,LSCs)的形态学特征、数量
2、及分布。方法健康成年新西兰大耳兔30只,体重2.0-2.5kg,雌雄不分,取双侧眼球,常规石蜡切片,HE染色及免疫组化P63染色显示角膜缘一般特征及LSCs的分布,并用BioMias图像分析软件对LSCs进行计数。另外取3只兔眼角膜缘制作超薄切片,透射电镜观察。结果1.①角膜缘上皮细胞排列紧密,层数较多,基底层细胞呈矮柱状或立方形,核大而圆,位于细胞中央,着色较深。LSCs(P63阳性细胞)呈矮柱状或立方形,多位于角膜缘上皮基底层,在角膜缘浅层及角膜边缘有少量分布,在角膜中央上皮未见LSCs出现。2.②透射电镜观
3、察LSCs核较大,形状不规则,核内常染色质较多,异染色质散在分布,未凝集成块。胞质少,含较丰富的游离核糖体,其它细胞器少,细胞间可见较多的缝隙连接。3.③图像分析显示高倍镜视野下角膜缘上皮LSCs数量为35.25±8.93个。结论1.①LSCs具有原始细胞的超微结构特征,与其他干细胞形态相似。2.②LSCs主要位于角膜缘上皮基底层,在角膜缘浅层上皮及角膜边缘上皮内也有少量LSCs存在,在中央角膜上皮未见LSCs分布。关键词关键词:角膜缘干细胞角膜缘干细胞;形态学形态学;P63P63;超微结构中图分类号:R329.
4、2AMorphologicalStudyoftheLimbalStemCellsofRabbitSuMinZhengLinXuTingliangLiHongHuRongHuangYue(Departmentofhistologyandembryologyof,GuiYangmedicalcollege,(GuiYang550004)ABSTRAC:ObjectiveToinvestigatethemorphologicalcharacteristics,quantityanddistributionoftheli
5、mbalstemcells(LSCs)ofrabbit.MethodsThe30NewZealandrabbitsofthatweigh2?.0-2.5kgwerehealthyadultmaleorfemale.Theireyeswereslicedintotheparaffinsections.?WeobservedthemorphologicalcharacteristicofthelimbusofthecorneawithHematoxylin-Eosinstaining.TheLSCswereshowe
6、dbyimmunohistochemistrytechnique(P63-staining)andelectronmicroscopy.TheP63-positiveLSCswerecountedwiththeBioMiassoftwareofimageanalysis.Results1.Thelimbalepithelialcellswerecloselyaggregatedandthelayersofthecellsweremorethanthecentralzoneofthecornea.Thecellso
7、fthebasallayerwerelowcolumnarorcubicshapeandtheirnucleiwerecentrallypositionandstaineddarkerblue.TheP63-positiveLSCsappearedlowcolumnarorcubicshape.ManyP63-positiveLSCswerelocatedinthebottomofthelimbalepithelium.TherewereafewofP63-positiveLSCsinthesuperficial
8、limbalandtheedgeofthecornealepithelium.Itdidn’tdetectinthecentralcornealepithelium.2.TheLSCsdisplayedtheultrastructuralfeaturesoftheprimitivecells5underthetransmissionelectronmicroscope.T
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