兔角膜缘干细胞的形态学研究

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1、兔角膜缘干细胞的形态学研究＊苏敏＊基金项目：贵州省科技厅黔科合J字（2006）082号作者简介：苏敏（1971年—），通讯作者，女，贵州省遵义市（县）人，汉族，硕士，副教授，主要从事实验组织学方面的研究，发表论文9篇。电话：（0851）6908567，E-mail：summ30@163.com＊基金项目：贵州省科技厅黔科合J字（2006）082号郑琳许庭良李红胡蓉黄悦（贵阳医学院组织学与胚胎学教研室，（贵州贵阳550004）摘要:目的探讨兔角膜缘干细胞（LimbalStemCells,LSCs）的形态学特征、数量

2、及分布。方法健康成年新西兰大耳兔30只，体重2.0-2.5kg，雌雄不分，取双侧眼球，常规石蜡切片，HE染色及免疫组化P63染色显示角膜缘一般特征及LSCs的分布，并用BioMias图像分析软件对LSCs进行计数。另外取3只兔眼角膜缘制作超薄切片，透射电镜观察。结果1.①角膜缘上皮细胞排列紧密，层数较多，基底层细胞呈矮柱状或立方形，核大而圆，位于细胞中央，着色较深。LSCs（P63阳性细胞）呈矮柱状或立方形，多位于角膜缘上皮基底层，在角膜缘浅层及角膜边缘有少量分布，在角膜中央上皮未见LSCs出现。2.②透射电镜观

3、察LSCs核较大，形状不规则，核内常染色质较多，异染色质散在分布，未凝集成块。胞质少，含较丰富的游离核糖体，其它细胞器少，细胞间可见较多的缝隙连接。3.③图像分析显示高倍镜视野下角膜缘上皮LSCs数量为35.25±8.93个。结论1.①LSCs具有原始细胞的超微结构特征，与其他干细胞形态相似。2.②LSCs主要位于角膜缘上皮基底层，在角膜缘浅层上皮及角膜边缘上皮内也有少量LSCs存在，在中央角膜上皮未见LSCs分布。关键词关键词：角膜缘干细胞角膜缘干细胞；形态学形态学；P63P63；超微结构中图分类号：R329.

4、2AMorphologicalStudyoftheLimbalStemCellsofRabbitSuMinZhengLinXuTingliangLiHongHuRongHuangYue（Departmentofhistologyandembryologyof，GuiYangmedicalcollege,（GuiYang550004)ABSTRAC：ObjectiveToinvestigatethemorphologicalcharacteristics，quantityanddistributionoftheli

5、mbalstemcells(LSCs)ofrabbit.MethodsThe30NewZealandrabbitsofthatweigh2？.0-2.5kgwerehealthyadultmaleorfemale.Theireyeswereslicedintotheparaffinsections.？WeobservedthemorphologicalcharacteristicofthelimbusofthecorneawithHematoxylin-Eosinstaining.TheLSCswereshowe

6、dbyimmunohistochemistrytechnique(P63-staining)andelectronmicroscopy.TheP63-positiveLSCswerecountedwiththeBioMiassoftwareofimageanalysis.Results1.Thelimbalepithelialcellswerecloselyaggregatedandthelayersofthecellsweremorethanthecentralzoneofthecornea.Thecellso

7、fthebasallayerwerelowcolumnarorcubicshapeandtheirnucleiwerecentrallypositionandstaineddarkerblue.TheP63-positiveLSCsappearedlowcolumnarorcubicshape.ManyP63-positiveLSCswerelocatedinthebottomofthelimbalepithelium.TherewereafewofP63-positiveLSCsinthesuperficial

8、limbalandtheedgeofthecornealepithelium.Itdidn’tdetectinthecentralcornealepithelium.2.TheLSCsdisplayedtheultrastructuralfeaturesoftheprimitivecells5underthetransmissionelectronmicroscope.T