3,6-二羟黄酮降低白血病细胞hl-60抗氧化酶活性并影响mapks信号通路

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1、3,6-二羟黄酮降低白血病细胞HL-60抗氧化酶活性并影响MAPKs信号通路林辉基金项目:国家自然科学基金(30671754)作者简介:林辉,男,江西省南昌市人,硕士研究生,助教,主要从事植物黄酮与肿瘤方面的研究。电话:(023)68752291,E-mail:linhui77@tom.com13228686229通信作者:糜漫天,电话:(023)68752292收稿日期:2009-01-15;修回日期:2009-02-16,糜漫天,常徽(第三军医大学军事预防医学院营养与食品卫生学教研室,重庆市营养与食品安全重点实验室,重庆400038)摘要:目的观察3,6-二羟黄酮对白血病细胞

2、HL-60抗氧化酶活性及MAPKs信号通路的影响,探讨其抗肿瘤作用分子机制。方法采用CASY-TT亚流式细胞分析技术测定3,6-二羟黄酮对白血病HL-60细胞存活率的影响;化学比色法测定3,6-二羟黄酮作用HL-60细胞后,细胞内抗氧化酶SOD、CAT、GSH-Px的活性变化;Westernblot检测胞内ERK、p38MAPK及JNK蛋白磷酸化水平变化。结果3,6-二羟黄酮显著降低HL-60细胞存活率,其作用呈剂量和时间依赖性;20µmol/L3,6-二羟黄酮作用于HL-60细胞,胞内抗氧化酶SOD、CAT、GSH-Px活性显著降低,MDA含量显著升高(P<0.05);West

3、ernbloting检测结果表明,20µmol/L3,6-二羟黄酮作用HL-60细胞2、8、24h,P-ERK蛋白水平明显降低(P<0.01)、P-p38MAPK和P-JNK的蛋白水平则显著升高(P<0.01)。结论3,6-二羟黄酮可显著降低HL-60细胞内抗氧化酶活性,增加胞内氧化应激压力,并由此影响MAPKs信号通路,这可能是其诱导HL-60细胞凋亡和增殖抑制的重要分子机制。关键词:3,6-二羟黄酮;HL-60细胞;抗氧化酶;MAPKs信号通路3,6-dihydroxyflavonedecreaseanti-oxidativeenzymeactivitiesandchange

4、MAPKssingalingpathwayinhumanleukemiaHL-60cellsLINHui,MIMan-tian,CHANGHui(DepartmentofNutritionandFoodHygiene,CollegeofPreventiveMedicine,ThirdMilitaryMedicalUniversity,Chongqing400038,China)Abstract:ObjectiveToinvestigatetheintracellularmechanismsof3,6-dihydroxyflavoneresultinginapoptosisofHL

5、-60cells.MethodsThesurvivalrateofHL-60cellswasanalyzedusingahaemocytometerwithstandardtrypanbluedyeexclusionandaCASY1particlecountingsystem.Thecontentsofmalonidaldelyde(MDA)andtheactivitiesofsuperoxidedismutase(SOD),catalase(CAT)andglutathioneperoxidase(GSH-Px)inthecellsweremeasuredbychemochr

6、omatometryrespectively.TheexpressionofphosphorylationofERK,JNKandp38MAPKwereexaminedbywesternblot.ResultsThesurvivalrateofHL-60cellswassignificantlyreducedinconcentrationanddurationdependentmannerafter3,6-dihydroxyflavonetreatment.TheactivityofSOD,CATandGSH-Pxwassignificantlydecreased,andthec

7、ontentofMDAwassignificantlyincreased(P<0.05).TheproteinlevelofphosphorylationofERKinHL-60cellswhichweretreatedfor2h,8h,24hby3,6-dihydroxyflavonewasdecreasedsignificantlycomparedwithuntreatedgroup(P<0.01),theexpressionofphosphorylationofJNKand

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