产前地中海贫血的基因诊断进展研究

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1、产前地中海贫血的基因诊断进展研究黄金芬(广西贵港市妇幼保健院优牛遗传科537100)【摘要】地中海贫血是我国临床中最常见的遗传病之一，木文主要针对α地贫进行研究，重型α地中海贫血多会导致在妊娠末期胎死宫内，或出牛后数分钟内死亡，具有严重的危害性。木文综述产前α地中海贫血的基因诊断进展，探讨在产前诊断地中海贫血的有效措施，做好产前诊断预防工作，降低地中海贫血患儿的出生率，全面了解产前地中海贫血的基因诊断现状。【关键词】α地中海贫血诊断进展基因诊断产前地中海贫血【中图分类号】R394【

2、文献标识码】A【文章编号】2095-1752(2013)36-0056-02α地中海贫血作为世界上最常见的血液系统遗传病之一，多是由于人体内α珠蛋白基因缺失以及功能障碍而导致α珠蛋白肽链合成受阻造成的疾病［1］。由于地中海贫血的基因具有种族以及地理分布特征，而我国南方作为地中海贫血的高发地区，做好产前检测工作，针对高风险胎儿进行产前基因诊断，可在产前发现中重型地中海贫血胎儿，并进行选择性流产，可以有效降低地中海贫血患儿的出生率及死亡率。以下综述当前在产前地中海贫血中基因诊断的进展。1&alph

3、a;地中海贫血病因α地中海贫血是由于在人体的α珠蛋白基因，主要是位于第16号染色体的短臂末端［2］,由于此基因簇中有2个重复的α基因、一个胚胎期类α基因、三个假基因以及一个功能未名的基因，其中若是缺失两个α基因，就将会严重影响α珠蛋白肽链合成，从而产生地中海贫血。我国最常见的地中海贫血基因为-SEA、-α3.7>-α4.2缺失型突变与HbCS、HbQS、HbWS点突变［3］,对于非缺失型HbH地中海贫血患者，其大多数临床症状比缺失型H

4、bH患者更严重。以下针对缺失型α地中海贫血与非缺失型α地中海贫血的基因诊断方法进行综述。2缺失型α地中海贫血基因诊断2.1限制性内切酶谱结合Southern印迹分析在针对缺失型地中海贫血基因诊断中，采用Southern印迹杂交技术，分析基因的大片段缺失以及重复突变情况。采用这种方法诊断地中海贫血，需用放射同位素费吋费力，但是由于该种方法检测结果可靠，稳定性高因此依然是基因诊断地中海贫血的好方法。2.2溶解曲线结合多重PCR分析根据双链DNA结合荧光染料SBR-GreenI与不同双链DNA不同解

5、链温度的特点，运用PCR集合溶解曲线的方法⑹，将单管与多重PCR后产物进行溶解曲线分析，也可鉴定出患者是否存在产前α地中海贫血症状。2.3片段大小结合缺口PCR分析在产前α地中海贫血的基因诊断中,也可以采取缺口PCR与片段大小分析相结合的方式,设计好引物同缺失序列两侧翼序列互补[7],根据长度片段分析是否患有地中海贫血。采用这种基因诊断方法，可以根据扩增片段的大小，很好地去区分正常杂合子同纯合子个体，检测出基因大片段的缺失。2.4多重连接酶结合探针扩增技术在产前α地中海贫血基因诊断方法中，应用

6、MLPA技术，对待测核酸中靶序列进行定性以及定量分析,并采用杂交、连接以及PCR扩增反应⑻，检测核昔酸序列拷贝数的变化，这种基因诊断方法不仅具有很好的重复性，口特异性高，可以同吋检测出已知、未知的人片段缺失以及重复突变[9],可以检测出11种新的缺失型地中海贫血基因，具有很好的临床诊断疗效。3非缺失α地中海贫血基因诊断3.1限制性内切酶酶谱结合PCR分析对于非缺失α地中海贫血产前的基因诊断中，可以采用此种方法进行诊断，不仅可直接根据观察条带长度的差异[10],使用此方法还具有简便、快捷的特点，主要针对已知

7、的非缺失α地中海贫血。3.2多重扩增不应突变系统对于产前α地中海贫血的基因诊断中，可以采用ARMS,针对各突变位点设计出相应引物，然后通过扩增突变的特异性长度片段［11］,根据产物片段的大小来分析各突变情况，也是针对已知的地中海贫血。3.3基因芯片技术采用基因芯片及DNA微阵列技术［12］,将人量已知的序列探针集成在基片上，然后可以通过检测杂交信号，对生物细胞以及组织中的基因信息去进行分析，采用这种基因诊断方法，不仅具有高度的并行性、微型化［13］,还具有多样性以及自动化的优点。3.4变性高效液相色谱技术

8、这种基因诊断技术，主要应用在未知型非缺失产前α地中海贫血产前诊断中，可自动检测出单碱基替代以及在小片段内核昔酸的插入、缺失［14］,敏感性较高，是高性价比的基因检测技术。3.5基因测序技术对于非缺失型产前α地中海贫血产前诊断中，采用基因测