环境因素对微生物的影响和紫外诱变效应

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1、环境因素对微生物的影响和紫外诱变效应生32程雨嬪2013012406实验同组人：谢丰实验时间2015年4月24日实验目的1）了解物理因素、化学因素及生物因素抑制或杀死微生物的作用及其试验方法。2）了解紫外线诱变原理，并初步掌握紫外线诱变冇种的方法。3）练习单菌落划线分离微生物。实验原理在自然界中，微生物分布极其广泛，儿乎无处不在，微生物的生长发育受着环境因素的影响。而不同的微生物及微生物不同的生理状态受环境因索影响的程度也不同，冇的环境因素是微生物生长繁殖所必需的条件，有的表现为抑制作用，有的表现为杀菌作用。温度通过

2、影响蛋口质、核酸等牛物大分子的结构与功能以及细胞结构來影响微生物的牛•长、繁殖和新陈代谢。微卞物群休牛长、繁殖最快的温度为具最适牛长温度，但它并不等于积累某一代谢产物的最适温度。粘质沙雷氏菌能产生红色或紫红色色素，菌落表面颜色随着色素量的增加呈现出由橙黄到深红色逐渐加深的变化趋势。常用的化学消毒剂主要包括重金属及其盐类、有机溶剂（酚、醇、醛等）、卤族元素及其化合物和表血活性剂等。根据是杀死还是抑制微生物，可分为致死剂和抑制剂。常用的3个指标：最低抑制浓度（MIC）、半致死剂量和最低致死剂量。许多微生物在其生命活动过程

3、中能产生某种特殊代谢产物如抗生素，具有选择性地抑制或杀死其他微生物的作用。不同抗牛素的抗菌谱是不同的，某些抗生索只对少数细菌有抗菌作用。产黄青霉分泌青霉素抑制细菌细胞壁的合成。青霉素主耍抗G+细菌。链霉素作用于核糖核酸30S亚基，所以链霉素只作用原核生物。链霉素以抗CT细菌为主。紫外线具有杀菌作用主耍是因为它诱导形成胸腺喘噪二聚体来破坏DNA的结构，使其不能正常行使功能。另外，空气在紫外线照射下产生臭氧（O）也有一定杀菌作用。紫外线杀菌力最强的波长是226-256nm部分。紫外线透过物质能力很差，所以只适用于空气及物

4、体表面的灭菌，它距离照射物以不超过1.2米为宜。紫外线对于人体也有伤害作用。紫外线对细菌生长的影响是随着紫外线对微生物照射剂量、时间及距离的不同，对微生物的牛理活动也相应地产牛不同的效果：剂量高、时间长、距离短就易杀死它们，剂量低、时间短、距离长时就会有少量个体残存下来，其中一•些个体的遗传特性发生了变界。我们可以利用这种特性来进行灭菌或菌种选育工作。紫外诱变最冇效的波长仅仅是在253〜265nm,-般紫外线杀菌灯所发射的紫外线大约有80%是254nmo实验仪器、材料和用具紫外照射箱，25°C、30°C、32°C、3

5、4°C、37°C培养箱淀粉培养基平板在一边已长成一直线状菌落的泾阳链霉菌平板1个培养18小时的金黄色葡萄球菌、人肠杆菌、枯草杆菌菌液、粘质赛氏杆菌的平板无菌的小圆滤纸片、接种环、酒精灯、记号笔、试管架1%稀释的84消痔液，1%甲醛，75%乙醇，95%乙醇，1%过氧化氢，2%的碘液实验步骤1.温度对微牛•物（粘质赛氏杆菌）的影响实验用接种环取培养好的粘质赛氏杆菌单菌落，在两个平板上分区划线接种，要保证能得到单一菌落。做好标记，将第一个平板在25°C,第二个在30°C进行培养，第三个在37°C进行培养。24h后取出，观察

6、不同温度卜-培养粘质赛氏杆菌牛长状况和产牛色索情况。2.化学因素对微生物生长的影响用无菌吸头吸取100卩1金黄色葡萄球菌菌液于培养基上，用无菌涂布棒涂布均匀。将上述培养血用记号笔分成六等份，每一等份内标明一种商物名称。用无菌蹑子将小滤纸片分別浸入各种药剂中，然后対号放入培养皿的小区内。注意不要造成药品交叉污染。置32°C温室培养24h后，观察。比较抑菌圈人小。3.生物因素对微工物工长影响取已接种泾阳链球菌并培养48小时的平板，在菌苔边缘5毫米处垂直向外划直线接种人肠杆菌，枯草杆菌，金黄色葡萄球菌。32°C培养24小时

7、，观察结果。4.紫外线的对微生物的影响用无菌吸头吸取ioom金黄色葡萄球菌液于培养基平板上，以无菌涂棒涂布均匀；用一张三角形或任意形状的纸条遮住部分平板培养基，打开皿盖，置紫外灯下照射5min后取出纸，盖上皿盖。在黑暗中（或红灯下）用双层报纸包裹，倒置于32°C培养24h后观察结果。5.紫外线对微生物的诱变效应取枯草杆菌菌液0.1ml加入0.9ml生理盐水中，进行10倍稀释，依次做10“〜10〃稀释。取10=10乃、10_6>10_10-8各100卩1菌液涂平板，除10“外每稀释度3块板，10“涂6块板。紫外线处S

8、：10-6照射30s,10*照射lmin,10'4照射2min。以10=10刁和10”平板作对照。处理后的培养皿在黑暗屮（或红灯下）用双层报纸纸包好，倒置32°C培养，24h后观察并记录结果。实验结果与讨论1.温度对微生物的影响实验对处理好的平板不同温度下培养24h后，实验结果如下表所示（表1）：表1温度对粘质赛氏杆菌生长影响的实验结果培养温度