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《pegfp-n1-tgf-β1重组质粒对结肠癌细胞增殖,细胞周期及侵袭性的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、pEGFP-N1-TGF-β1重组质粒对结肠癌细胞增殖﹑细胞周期及侵袭性的影响问题1：【作者介绍:】于宏(1982-),女,（）省/市人，硕士研究生,主要研究方向:从事消化系统肿瘤方面的研究.。【通信讯作者】:姜政(1965-),男,主任医师,教授,硕士研究生导师.E-mail:jiangz1753@163.com.于宏，姜政*，王丕龙（400016重庆重庆医科大学.附属第一医院消化科）【摘要】目的探讨在体外探讨转化生长因子-β1（TGF-β1）的真核表达载体对结肠癌细胞增殖﹑细胞周期及侵袭性的影响，为阐明TGF-β1在结肠癌发生、发展中的作用以及建立相应的基因沉寂治
2、疗途径奠定基础。方法将构建的重组质粒pEGFP-N1-TGF-β1转染入结肠癌细胞系SW480中，应用荧光显微镜、RT-PCR和Westernblot检测TGF-β1基因的表达情况。通过；MTT法检测细胞生长情况；流式细胞仪分析SW480细胞周期变化；Transwell侵袭试验验证TGF-β1对细胞侵袭能力的影响。结果转染重组质粒pEGFP-N1-TGF-β1后，通过荧光显微镜观察到绿色荧光的表达，RT-PCR和Westernblot检测到TGF-β1基因的转录及蛋白表达增强；细胞周期分析显示TGF-β1使细胞停留在G1期，S期细胞明显减少，同时发现SW480细胞的增
3、殖受到明显抑制，达到60%；Transwell侵袭试验显示：SW480细胞的侵袭能力明显增强。结论TGF-β1能抑制SW480细胞的增殖，使细胞停留在G1期，但同时能增强其侵袭能力。其作用可能与免疫抑制/逃逸、增加血管生成以及增加肿瘤细胞与细胞外基质的相互作用有关。【关键词】转化生长因子-β1；SW480细胞；结肠癌；侵袭【中图分类号】 【文献标识码】 Theeffectoftransforminggrowthfactor-β1oncellcycle,proliferationandinvasivecapacityofhumancoloncancercells
4、YUhong,Jiangzhengetal.(DepartmentofGastroenterology,TheFirstAffiliatedHospital,ChongqingMedicalUniversity400016)【Abstract】Objective:Invitroinvestigatetheeffectoftransforminggrowthfactor-β1(TGF-β1)oncellcycle,cellproliferation,andinvasivecapacityofhumancoloncancercellsofthelineSW480,inor
5、dertolaythefoundationforelucidatingeffectsanditsmachaniamofTGF-β1incoloncarcinogenesisanddevelopment,aswellasconstructingthecorrespondencegenetherapywithRNAinterference.Methods:Therecombinantexpressingplasmids(pEGFP-N1-TGF-β1)wasconstructedandtransfectedintohumancoloncancercellsofthelin
6、eSW480cellsbyLipofeetamine2000.TheexpressionofTGF-β1mRNAandproteininSW480cellsweredetectedbyfluorescentmicroscopy,RT-PCRandWestenblotrespectively.ThecellproliferationofSW480cellswastestedbyMTTassay,thecellcyclewasanalyzedbyflowcytometry,andtheinvasionabilityofSW480cellswereinvestigatedb
7、ytranswell-matrigelinvasionchambers.Results:AftertransfectedintoSW480cells,bothmRNAandproteinlevelsofTGF-β1wereeffectivelyincreased.Comparedwiththecontrolgroup,theabilityofcellproliferationtransfectedwithpEGFP-N1-TGF-β1wasdecreasedsignificantly(P<0.05),theinhibitionrateswereinc
