anxa2和egfr在人脑胶质瘤中的表达及临床意义

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1、ANXA2和EGFR在人脑胶质瘤中的表达及临床意义杨斌,刘献志,李进军,辛艳超,翟瑛(450052郑州，郑州大学第一附属医院神经外科)[摘要]目的研究EGFR和ANXA2信号通路在不同级别人脑胶质瘤组织中的表达情况及临床意义。方法采用免疫组化S-P法分别对38例低级别胶质瘤(Ⅰ、Ⅱ级)和38例高级别胶质瘤（Ⅲ、Ⅳ级）以及10例正常脑组织中的ANXA2和EGFR的表达情况进行检测，并分析EGFR和ANXA2表达情况及其相关性。结果与正常脑组织相比，EGFR和ANXA2在人脑胶质瘤中的表达均显著增加。通过阳性区平均积分光密度定量分析，在

2、正常组、低级别胶质瘤组、高级别胶质瘤组EGFR和ANXA2数值分别为106.49±5.69和103.52±3.75、124.96±3.39和125.62±2.37、149.66±4.63和148.23±5.29，各组之间EGFR和ANXA2的测定值有统计学差异（F=86.58，F=101.83，P<0.05)，并且EGFR和ANXA2表达也呈现显著正相关（r=0.521,P<0.05)。结论EGFR和ANXA2在人脑胶质瘤中的表达均显著增加，且其表达具有的相关性。EGFR和ANXA2信号通路可能在人脑胶质瘤的发生、发展中起着一定的协

3、同作用。[关键词]人脑胶质瘤；EGFR；ANXA2；免疫组化[通信作者]刘献志，电话：（0371）66862242E-mail:lxz@zzu.edu.cn胶质瘤是颅内最常见的恶性肿瘤，其本质是一种多基因异常疾病。由于人脑胶质瘤在在发病过程中程侵袭性生长，所以治疗困难，手术难以全部切除，预后较差。膜联蛋白A2(annexin2,ANXA2)是一类钙依赖的磷脂结合蛋白,在DNA合成及细胞增殖中起重要作用，其C端可以和c-mycmRNA结合，来调节c-myc基因的功能，c-myc基因编码的蛋白可以作为转录来促进因子细胞增殖,在肿瘤形成中

4、发挥着生理和病理的多重作用[1]。上皮生长因子受体（epidermalgrowthfactorreceptor,EGFR）的是一种具有酪氨酸蛋白激酶活性的膜受体，与生长因子（epidermalgrowthfactor,EGF）构成的EGF/EGFR信号通路，被激活后可以将细胞外的信号传递到细胞内和胞核，现在已发现EGFR在恶性肿瘤中活性明显增高，可能与肿瘤的恶性程度有一定关系[2]。本文通过研究EGFR和ANXA2在不同病理级别人脑胶质瘤组织以及正常脑组织中的表达及其相关性，进一步探索人脑胶质瘤侵袭性的机制。1.材料与方法1.1实验

5、材料选取本科2008年5月至2011年2月收治的胶质瘤住院患者手术切除且保存完好的胶质瘤组织石蜡包埋标本76例，其中女性40例，男性36例，患者年龄6.5～83岁，平均44.09±2.06岁。根据2000年修改的WHO神经系统肿瘤分级标准来对其进行组织学的分级，其中Ⅰ级10例，Ⅱ级28例，Ⅲ级22例，Ⅳ级16例，其中把Ⅰ级和Ⅱ级人脑胶质瘤合并为低级别度恶性组，把Ⅲ级和Ⅳ级人脑胶质瘤级合并为高级别度恶性组，另取10例脑外伤患者的正常脑组织作对照，正常脑组织均来自本科同期因颅脑损伤行颅内减压术中切除的正常脑组织，并经我院病理科病理检验证

6、实为正常脑组织。选取标准，所有患者无其他严重合并症，无肥胖、糖尿病等代谢性疾病，术前均行MRI或CT检查，且患者均为第1次手术治疗，术前未进行过化疗和放疗。所有标本在手术切除后去除出血、坏死、电灼的组织，用生理盐水反复冲洗去除血污，2h内用10%福尔马林溶液浸泡固定，1周内用石蜡包埋，留以备用。1.2主要仪器与试剂1.2.1实验仪器电子天平(BS224S德国，220g/0.1mg)、德国Lecia显微照像系统（上海山富科学仪器有限公司）、分析系统（上海山富科学仪器有限公司，BiosensDigitalImagingSystemv1.

7、6）。1.2.2实验试剂兔抗人多克隆抗体EGFR和ANXA2为美国Signalwayantibodys公司生产；免疫组化染色采用S-P法，S-P9001试剂盒、DAB试剂盒、苏木精染液、PBS缓冲液(pH7.2~7.4)均购于北京市中杉金桥生物技术有限公司；其他实验必备试剂均由郑州大学基础医学院生化实验室提供。1.3实验方法采用S-P法进行EGFR和ANXA2检测，操作严格按照试剂盒说明书进行。兔抗人多克隆抗体EGFR和ANXA2分别用PBS稀释为1：100的浓度；PBS代替一抗作为阴性对照；采用已知阳性表达的胶质瘤标本作为阳性对照

8、。1.4免疫组织化学结果分析EGFR和ANXA2免疫组化均采用PBS代替一抗作空白对照，已知有阳性表达的肿瘤标本作为阳性对照，同时应用组内对照。采用BiosensDigitalImagingSystemv1.6分析系统在统一光强，统一