微生物实验报告

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1、脓汁和粪便标本中病原菌的检测09级临床心理113200900140026方海瑞❖实验目的①实验课教学的主要目标是使我们了解医学微生物学主要的研究方法和手段，掌握基木技能和基木原理，树立牢固的无菌观念。②培养我们自学能力、科学思维能力、动手能力和表达能力。③掌握检测脓汁和粪便标本中病原菌的基本方法和操作实验器材常用设备：隔水式电热恒温培养箱冷冻室固定器材：试管架酒精灯污物盘油性笔打火机奥林巴斯CX21型生物显微镜共用实验台：蒸馅水1%。新洁而灭玻片缸消毒液微生物器材柜（放微生物实验必备器材和试剂等）此次实验专用器材：天平，干粉培养基，浓汁标本1支，粪便标本1支，

2、碘酒棉球1瓶，酒精棉球1瓶，眼科锻子2把，伊红美兰平板2个，营养琼脂平板5个，斜而4支，细菌分离培养物（上次实验平板），斜面培养物4支，营养肉汤4支，生理盐水2支，营养肉汤培养物（菌液）4支，半固体琼脂4支，营养琼脂平板4个，糖发酵管1套，抗菌素纸片1套，眼科锻了2把，镜油瓶、拭镜纸1套，吸水纸1本，载玻片4张，半固体培养物4支，药敏试验培养物4个，微量发酵管培养物1套。•方法与步骤培养基的制备干粉培养基1蒸馆水一加热溶化一分装一集中放在试管筐里，然后罩上硫酸纸、牛皮纸，用橡皮筋扎好f放入讲台边的灭菌桶或灭菌筐内f送到髙压蒸汽灭菌室细菌的分离培养1接种环烧灼火

3、菌，接种环取液体标本经无菌取材后在平板划线（平板划线分离法）细菌的纯培养1甲一普通平板f黄色菌落一1支斜而乙f普通平板f口色菌落f1支斜面丙一伊红美蓝平板一紫黑菌落一1支斜面丁f伊红美蓝平板f粉红菌落一1支斜面收集平板f灭菌桶内（平板底部朝下，盖朝上放置）f速送灭菌室f高压蒸汽灭菌f洗刷。细菌的形态学检査革兰染色方法步骤涂片：干燥f固定一结品紫一初染1分钟一水洗f卢戈碘液一媒染1分钟一水洗一95%乙醇->脱色约20秒钟一水洗一稀禅复红一复染1分钟一水洗一吸干，镜检。细菌的糖发酵试验、动力试验抗菌索敬感性试验（滤纸片扩散法）凝固酶试验•结果与讨论1.实验室总体结

4、果与分析甲乙丙丁普通平板普通平板伊红美蓝平板伊红美蓝平板黄、白色菌落黄、白色菌落紫黑、粉红菌落粉红菌落表格1纯培养结果甲（黄色）乙（白色）丙（紫黑）T（粉色）青霉素敏感敏感耐药耐药链霉素敏感敏感敏感敏感庆大霉素敬感敬感敬感敬感表格2抗菌素敏感性试验结果甲（紫黑）乙（紫黑）丙（粉红）T（粉红）葡萄糖产酸产气/产酸不产气/乳糖/产酸产气/不产酸不产气半固体扩散生长扩散生长沿接种线生长沿接种线生长表格3糖发酵、动力试验结果黄色白色紫黑粉红革兰染色肉眼阳性（紫色）阳性（紫色）阴性（红色）阴性（红色）油镜下观察紫色，球形，呈葡萄串状排列红色，杆状红色，短杆状表格4革兰染

5、色结果黄色白色血浆凝固酶阳性阴性表格4血浆凝固酶实验根据上述各项试验结果，可判断甲乙丙丁同学纯化培养的细菌分别为金黄色荷萄球菌、表皮葡萄球菌、大肠埃希菌、志贺菌。2.个人（丙）实验结果与分析①在苏红美蓝平板培养基上肉眼可见紫黑和粉红的菌落，但菌落密集，分离不明显，很多地方都拧成了一块大的团状菌落，分不清那种是紫黑和粉红的菌落。这个很有可能是在平板划线分离操作不当引起的，划线次数不够，划线的角度太大或者划线的地区交叉重叠密集造成上述的结果。②从抗菌素药皱实验可以看岀来，甲（黄色）和乙（口色）对青霉素和链霉素都敏感，为革兰氏阳性菌，而丙（紫黑）和丁（粉红）对青霉素

6、耐药和对链霉素敏感，为革兰氏阴性菌。无论革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都对庆人霉索敏感,这就对我们医学工作中在临床上使用广谱抗生素有很大指导作用。③表格3糖发酵和动力实验结果一丙（粉红）荷萄糖产酸不产气，半固体穿刺接种沿接种线生长，根据常见肠道感染细菌主要生化反应特征，可以推断出，丙（粉红）菌落为福氏志贺菌。当然，为了更一步检验结果，还应该进行下一步革兰氏染色油镜镜检和血浆凝固酶实验。①通过了革兰氏染色结果一丙（粉红），阴性，红色，短棒状符合福氏志贺菌的特征。但还不能下定论，只能等待下一步血浆凝固酶实验。②表格4的血浆凝固酶实验结果显示实验组的结果为阳性，通过上面

7、一步步的实验最终确定了丙（粉红）菌落为福氏志贺菌。结果來Z不易，花费了大量的时间和复朵的工作，但这一切都是值得的，辛辛苦苦才做出来的成果最终带来的是巨大成就感，或许，这正是科学研究的严谨性魅力所在。