食品微生物 实验报告

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1、霉菌的培养与形态学观察实验一真菌培养基的配制与灭菌实验目的：（1）了解培养基的配置原理和方法，掌握分离培养微生物的有关准备工作。（2）掌握高压灭菌方法及原理实验原理：（1）培养基的制备原理：1.培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。2.从营养角度分析：♪营养：碳源、氮源、能源、生长素、水分和无机盐等；♪适宜的酸碱度(pH值)和一定缓冲能力；♪一定的氧化还原电位；♪合适的渗透压。琼脂是从石花菜等海藻中提取的胶体物质，是应用最广的凝固剂。加琼脂制成的培养基在98～100℃下融化，于45℃以下凝固，不容易被

2、微生物污染。但多次反复融化，其凝固性降低。（2）湿热灭菌原理－高压蒸汽灭菌在密闭的蒸锅内，其中的蒸汽不能外溢，压力不断上升，使水的沸点不断提高，从而锅内温度也随之增加。在0.1MPa的压力下，锅内温度达121℃。在此蒸汽温度下，可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。实验材料与方法7高氏I号琼脂（平板）5.6150  共1瓶，配好后包扎瓶口，直接高压，高压后再制平板每组小室培养法器材4套9cm平皿→内垫滤纸1层→放载玻片2块、盖玻片2片。（8付左右用报纸包好，高压）全室 镊子、载玻片、盖玻片、滴管、胶头、显

3、微镜镜检用物品（不用准备，实验室已提前准备好）配制培养基所需器材实验设备：高压蒸汽灭菌器。实验器材：500ml三角烧瓶、蓝盖瓶、5ml刻度吸管、培养基、天平、砝码、称量纸、药勺、500ml、100ml量筒、牛皮纸、硫酸纸、橡皮筋、铁丝筐、平皿、剪刀等。培养基等集中放讲台前高压桶内，送到洗刷室统一高压灭菌条件及注意事项高压灭菌条件：121.3℃，15min。含糖培养基113℃，15min。倒平板电炉加热灭菌好的培养基打开平皿包装倒平板（10块）注意事项：空气环境无菌（应在酒精灯火焰周围无菌区）。a.在酒精灯火

4、焰处，倾斜打开瓶口。b.瓶口要过火焰。c.左手掀开平皿小口。d.倾注满皿底再多一点，约10ml（7cm直径平皿）。e.推放一边要轻缓，不能晃起琼脂挂壁，易在培养过程中污染杂菌。f.完全凝固再翻转平板放塑料筐内，4℃备用。分析与讨论（1）如何证明培养基灭菌是否彻底?把灭菌后的培养基按灭菌锅内的不同位置，每处抽取数管(瓶)，标上记号，置25℃～30℃培养一周左右进行检查。如果培养基没有什么变化，说明灭菌效果良好；如果某一位置的培养基出现了杂菌菌落，可能是摆放的太紧，导致蒸汽不畅，或锅的结构不合理等原因所致，应根

5、据上述情况进行改进；如果大部分或全部菌种瓶都出现杂菌，说明灭菌温度或灭菌时间不够，应提高压力或延长灭菌时间。经过几次检验都证明能彻底灭菌后，以后按同样条件灭菌的则不必进行检查。经过几次检验都证明能彻底灭菌后,以后按同样条件灭菌的则不必进行检查。（2）为什么说消毒与灭菌是微生物学和临床医学必不可少的基本知识?由于病原生物广泛存在于自然界，可通过不同途径和媒介进入人体，引起感染或造成疾病流行。因此，杀灭或清除存在于体外传播媒介上的病原生物，对于切断传播途径、预防和控制其感染具有重要意义。自古以来，人们就利用煮沸

6、、火烧、日晒等方法杀灭或去除微生物，达到预防疾病的目的。实际上，除了在临床医疗实践中需要防止微生物的污染或感染外，在微生物学实验室、食物保存、饮水净化、药品与生物制品生产等过程中都需要避免微生物的污染。实验二霉菌的接种与培养实验目的与要求：掌握霉菌与酵母菌的接种与培养方法。实验原理：接种是微生物实验及科学研究中一项基本操作技术。根据实验目的和要求，选择合适的接种工具与接种方法，接种工具有接种环、接种针、接种铲、接种钩、吸管、滴管、棉签等。常用接种方法有：斜面接种，液体接种，穿刺接种，平板接种和固体接种。接种

7、的关键是无菌操作。无菌操作的原则：在酒精灯火焰旁进行，所有器皿均须严格消毒，培养基应事先做无菌试验，接种工具使用前后须经火焰烧灼灭菌，棉塞不能乱放，始终夹在手指中。在培养四大类微生物时应注意选择适宜的培养条件。多数细菌为专性需氧菌与兼性需氧菌，少数为厌氧菌。多数食品腐败菌和工业用菌种，以及人和动物病原菌的最适生长温度为37℃，并且在近中性（PH6.5～7.5）条件下生长良好。多数放线菌为好氧菌，少数为厌氧菌，最适生长温度为28～30℃，多数适宜在偏碱性环境中生长（PH7.5～8.5）。实验材料与方法（1）实

8、验材料：实验设备：温箱。实验器材：毛霉、曲霉、青霉、根霉、啤酒酵母、白假丝酵母、新生隐球酵母菌、细黄链霉菌、PDA平板、高盐察氏平板、高氏合成I号平板、塑料筐、20%甘油水溶液、镊子、接种铲、无菌盖玻片、无菌滤纸、无菌载玻片、石棉网、牛皮纸、硫酸纸、橡皮筋、铁丝筐等。（2）实验方法：平板接种：毛霉→PDA平板（点植法）啤酒酵母→PDA平板（五区分离划线法）青霉、曲霉→PDA平板（连续划线法）小室载玻片培养法：1、