铅暴露大鼠脑不同区域nmda受体亚基（nr1、nr2a、nr2b）表达的研究

《铅暴露大鼠脑不同区域nmda受体亚基（nr1、nr2a、nr2b）表达的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果铅暴露大鼠脑不同区域NMDA受体亚基（NR1、NR2A、NR2B）表达的研究【摘要】观察铅暴露大鼠中不同脑区NMDAR1、NMDAR2A和NMDAR2B亚基蛋白和mRNA水平的表达情况。方法：采用WesternBlot及RTPCR技术，测定NR1、NR2A和NR2B亚基蛋白和mRNA在铅暴露大鼠脑中额叶皮质、新小脑、海马及纹状体中的表达情况。结果：铅暴露大鼠中NR1、NR2A和NR2B亚基的蛋白水平和mRN

2、A表达在各个脑区均有不同程度的下调。结论：在铅暴露大鼠的额叶皮质、海马、新小脑和纹状体中，NMDA受体亚基NR1，NR2A和NR2B的表达在mRNA水平就已经发生了改变。【关键词】NR1亚基ＡｂｓｔｒａｃｔObjective：ToinvestigatethechangeofNMDAR1,NMDAR2AandNMDAR2Bsubunitexpressioninthedifferentbrainregionofplumbumexposure:WesternblottechniqueandRT-PCRtechniquewereusedtodete

3、rminetheexpressionofNR1,NR2AandNR2BsubunitprotEinandmRNAexpressioninPbexposureratsbraincortexoffrontallobe,neocerebellum,hippocampusand:ThelevelsofNR1,NR2AandNR2BsubunitprotEInandmRNAsexpressionindifferentregionsofthebrainfromPbexposureratshaddifferent课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内

4、作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果degreedownregulation.Conclusion:TheexpressionofNMDAreceptorsubunitNR1,NR2AandNR2BhadchangedatmRNAlevelinthecortexoffrontallobe，neocerebellum，hippocampusandcorporastriatafr

5、omPbexposurerats.KeywordsAlzheimersdisease(AD);NR1subunit;NR2Asubunit;NR2BsubunitN-甲基-D-天门冬氨酸受体是离子型谷氨酸受体的一个亚型，通过对其药理、生理、病理等方面的研究已经证实，NMDA受体在生物发育过程中有着重要的生理作用，可调节神经元的活性，树突、轴突结构的发育及突触可塑性等，在神经元回路的形成及学习和记忆的突触机制中，NMDA受体也起着关键作用[1～4]。正常神经系统的发育需要兴奋性氨基酸受体活性处于最佳水平，如果NMDA受体活性过低则可能使发育

6、延迟，而活性过高又可能导致神经元损伤或脑损伤[5～7]。本研究采用了铅暴露大鼠模型，研究NMDA受体在铅暴露大鼠学习记忆障碍中的变化，探讨其可能的机制。　　1材料与方法课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果动物及模型制备40只一月龄SpragueDawley大鼠由沈阳医学院实验动物中心提供，雌雄不拘，体重g，随机分成5组，各8只。铅暴

7、露组分饲%、%、%、%用蒸馏水配制的醋酸铅溶液，对照组给予蒸馏水。3周后娩出子鼠，子鼠21天起断乳，喂以母鼠相同的饮水并单独饲养。当母鼠18个月龄时，采用朱启文等先前报道过的大鼠多功能行为训练装置[8]，在术前及术后14d开始被动回避反应训练。将铅暴露大鼠模型合格者处死取脑标本进行下列实验。方法WesternBlot分析试剂：NR1、NR2A多克隆抗体购于santacruz公司；NR2B购于博士德生物工程有限公司；辣根过氧化物酶标记兔抗羊和羊抗兔抗体购于中山公司。样品处理：取大鼠不同脑区标本，切取一部分，裂解脑组织提取总蛋白。上样，电泳，湿

8、转至PVDF膜上，5%脱脂奶粉封闭。将PVDF膜在置于4℃NMDA受体杂交液中摇床过夜，然后在过氧化物酶标记二抗杂交液中孵育1h。最后ECL发光显影。组织总RNA的提取及RTP