蛋白芯片技术检测结核分枝杆菌igg抗体结果分析_1

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1、从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果蛋白芯片技术检测结核分枝杆菌IgG抗体结果分析［摘要］目的：分析结核菌的特异性细胞壁脂阿拉伯甘露糖(LAM)的抗体、1KDa抗体和3KDa抗体3种特异性抗体的检出率及临床意义。方法：用PBI型生物芯片识别系统及相应检测试剂盒进行检测。结果：在检测的434例标本中，全阴占62．7%，3种抗体均为阳性的占4．1%，LAM抗体和3KDa抗体同时阳性占29．5%，LAM抗体单

2、项阳性的占2．8%，1KDa抗体单项阳性占0．9%。结论：LAM抗体、1KDa抗体和3KDa抗体的检测对结核病的诊断具有重要的临床意义。［关键词］结核杆菌抗体；蛋白芯片技术检测；结果分析结核病(tuberculosis)是由结核分枝杆菌(Mycobacteruintuberculosis)引起的一种慢性传染病。目前全球有结核患者000万人，我国目前有4亿人感染过结核菌，现有的传染性核患者达200万人。利用蛋白芯片技术，检测抗结核菌的特异性细胞壁脂阿拉伯甘露糖(Lipoarabinomannan,LA

3、M)抗原的抗体、1KDa抗体和3KDa抗体3种对结核杆菌诊断具有特异性的3种抗体，对结核病的诊断及治疗具有重要的临床意义。１　实验方法1．1　标本来源　XX年6月至XX年6月，本院住院及门诊患者。课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果1．2　仪器及试剂　PBI型生物芯片识别系统及相应试剂盒，南京

4、大渊生物工程有限责任公司生产。1．3　操作方法　取静脉血ml，分离血清。按本产品使用说明书进行操作。　2　结果．1　试验结果　434例血液标本中有162例标本检出3种抗体中的一种或几种抗体，阳性率为37．3%。结果见表1。表1　434例结核分枝杆菌IgG抗体检出结果　讨论．1　结核分枝杆菌的LAM是细胞壁重要组成成分　结核菌的LAM含量比其他分枝杆菌的含量高许，因此许多研究都认为检测患者血清中的抗LAM抗体是诊断结核病的重要标志之一。LAM要分布于细胞壁表面，组成成分为碳水化合物。主要生物学活性为具

5、有抗原性、抑制T淋巴细胞增殖、破坏巨噬细胞的干扰、清除有毒的自由基、抑制蛋白激酶的活性及其他在宿主体内的有害活性。目前，LAM的主要用途是将其作为主要的包被或者样抗原，以检测结核患者血清中的相应抗体，用于结核病的诊断。．2　结核分枝杆菌的1KDa蛋白　1KDa是指结核分枝杆菌主要蛋白抗原63(majorprotEinantigen6of课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论

6、意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果tuberculosis,MPT　63)抗原，因为其分子量为1KD,故名1KDa，主要存在于培养滤液中，MPT　63抗原的种特异性：非MTC分枝杆菌缺乏MPT　63，MPT　63没有环境中常见的分枝杆菌抗原表位，其可作为非常有潜力的免疫诊断用抗原［1］。　　3．3　结核分枝杆菌的38　KDa蛋白　利用免疫电泳技术测得其分子量为3KDa，故称之为3KDa蛋白。3KDa蛋白为脂蛋白，存在于细胞外，含25%碳水化合物，是从细胞

7、分泌的，其与细胞膜或者菌体表面的脂肪结构相连。分枝杆菌中只在结核菌和牛分枝杆菌(Mboris)发现3KDa蛋白，而且结核菌的反应强度较牛分枝杆菌强10倍。.4　结核多种抗原IgG抗体蛋白芯片检测系统由芯片和试剂两部分组成　芯片以微孔滤膜为载体，同时将结核分枝杆菌(结核菌)的特异性细胞壁脂多糖抗原LAM和经重组DNA技术生产纯化的结核菌的1KDa和3KDa的特异性抗原固定在特制的载体上，利用微孔滤膜的渗滤、浓缩、凝集作用，捕捉被检样品中特异性抗体,使抗原抗体反应在固相膜上快速进行，复合物再与标记有的二

8、抗金溶胶试剂作用,在膜上形成紫红色的斑点。显色后通过芯片识别系统进行分析课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果，判定结果用于结核菌感染的临床辅助诊断。该产品结合了基因重组技术、斑点免疫渗滤技术与微阵列技术，是结核菌抗体快速诊断的一大突破。由于人群中感染结核分枝杆菌