蛋白芯片技术检测结核分枝杆菌igg抗体结果分析

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1、蛋白芯片技术检测结核分枝杆菌IgG抗体结果分析〔摘要〕目的：分析结核菌的特异性细胞壁脂阿拉伯甘露糖(LAM)的抗体、16KDa抗体和38KDa抗体3种特异性抗体的检出率及临床意义。方法：用PBI型生物芯片识别系统及相应检测试剂盒进行检测。结果：在检测的434例标本中，全阴占62．7%，3种抗体均为阳性的占4．1%，LAM抗体和38KDa抗体同时阳性占29．5%，LAM抗体单项阳性的占2．8%，16KDa抗体单项阳性占0．9%。结论：LAM抗体、16KDa抗体和38KDa抗体的检测对结核病的诊断具有重要的临床意义

2、。　　〔关键词〕结核杆菌抗体；蛋白芯片技术检测；结果分析　　结核病(tuberculosis)是由结核分枝杆菌(Mycobacteruintuberculosis)引起的一种慢性传染病。目前全球有结核患者2000万人，我国目前有4亿人感染过结核菌，现有的传染性核患者达200万人。利用蛋白芯片技术，检测抗结核菌的特异性细胞壁脂阿拉伯甘露糖(Lipoarabinomannan,LAM)抗原的抗体、16KDa抗体和38KDa抗体3种对结核杆菌诊断具有特异性的3种抗体，对结核病的诊断及治疗具有重要的临床意义。　　１　实

3、验方法　　1．1　标本来源　2005年6月至2004年6月，本院住院及门诊患者。　　1．2　仪器及试剂　PBI型生物芯片识别系统及相应试剂盒，南京大渊生物工程有限责任公司生产。　　1．3　操作方法　取静脉血2ml，分离血清。按本产品使用说明书进行操作。　　2　结果　　2．1　试验结果　434例血液标本中有162例标本检出3种抗体中的一种或几种抗体，阳性率为37．3%。结果见表1。　　表1　434例结核分枝杆菌IgG抗体检出结果（略）　　3　讨论　　3．1　结核分枝杆菌的LAM是细胞壁重要组成成分　结核菌的LAM

4、含量比其他分枝杆菌的含量高许，因此许多研究都认为检测患者血清中的抗LAM抗体是诊断结核病的重要标志之一。LAM要分布于细胞壁表面，组成成分为碳水化合物。主要生物学活性为具有抗原性、抑制T淋巴细胞增殖、破坏巨噬细胞的干扰、清除有毒的自由基、抑制蛋白激酶的活性及其他在宿主体内的有害活性。目前，LAM的主要用途是将其作为主要的包被或者样抗原，以检测结核患者血清中的相应抗体，用于结核病的诊断。　　3．2　结核分枝杆菌的16KDa蛋白　16KDa是指结核分枝杆菌主要蛋白抗原63(majorproteinantigen63

5、oftuberculosis,MPT　63)抗原，因为其分子量为16KD,故名16KDa，主要存在于培养滤液中，MPT　63抗原的种特异性：非MTC分枝杆菌缺乏MPT　63，MPT　63没有环境中常见的分枝杆菌抗原表位，其可作为非常有潜力的免疫诊断用抗原〔1〕。　　3．3　结核分枝杆菌的38　KDa蛋白　利用免疫电泳技术测得其分子量为38KDa，故称之为38KDa蛋白。38KDa蛋白为脂蛋白，存在于细胞外，含25%碳水化合物，是从细胞分泌的，其与细胞膜或者菌体表面的脂肪结构相连。分枝杆菌中只在结核菌和牛分枝杆菌

6、(Mboris)发现38KDa蛋白，而且结核菌的反应强度较牛分枝杆菌强10倍。　　3.4　结核多种抗原IgG抗体蛋白芯片检测系统由芯片和试剂两部分组成　芯片以微孔滤膜为载体，同时将结核分枝杆菌(结核菌)的特异性细胞壁脂多糖抗原LAM和经重组DNA技术生产纯化的结核菌的16KDa和38KDa的特异性抗原固定在特制的载体上，利用微孔滤膜的渗滤、浓缩、凝集作用，捕捉被检样品中特异性抗体,使抗原抗体反应在固相膜上快速进行，复合物再与标记有的二抗金溶胶试剂作用,在膜上形成紫红色的斑点。显色后通过芯片识别系统进行分析，判定

7、结果用于结核菌感染的临床辅助诊断。该产品结合了基因重组技术、斑点免疫渗滤技术与微阵列技术，是结核菌抗体快速诊断的一大突破。由于人群中感染结核分枝杆菌十分普遍，健康人体内也会携带低水平的抗结核分枝杆菌抗体，这就要求试剂的敏感性即不能太高，也不能太低。敏感性太高，能检出任何水平的抗体，就会增加假阳性率；反之，敏感性太低，某些较低水平抗体的结核病患者就可能被漏诊〔2〕。　　3．5　结核3种抗原的IgG抗体蛋白芯片检测意义　当LAM、38KDa任意一指标为阳性结果或单一指标呈阳性时，表示患者体内有活动性结核分枝杆菌抗体

8、存在，结合临床症状后需要进行抗痨治疗。此两项指标可排除卡介苗接种的影响；仅当16KDa为阳性时，表示患者体内有结核分枝杆菌抗体，但不排除卡介苗接种的影响，需要结合其他信息进一步确认；当3项指标均为阳性时，表示患者体内有活动性结核分枝杆菌存在，需要及时的给予抗痨治疗；当3项指标均为阴性时，表示患者未被活动性结核分枝杆菌感染；当患者第1次检查时，某项指标为阳性时，但没有任何临床症状时，需要