新型病毒ttv感染的初步探讨

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1、从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果新型病毒TTV感染的初步探讨【摘要】　目的　探讨TTV病毒在不明原因肝炎中的意义及其所致肝损害的临床特征。方法　套式聚合酶链反应检测血清TTV病毒DNA并对TTV病毒阳性病例进行临床分析。结果　病原不明肝炎中TTV病毒感染率为%；均为散发病例，多见于青壮年，男女无差别；症状明显，黄疸常见，血清转氨酶中度升高；肝组织呈汇管区炎症；一般病例预后良好，但合并症易加重病情。结论　TTV病毒可以解释病原不明肝

2、炎中的部分病因。Aninquireintotheinfectionofanewvirus(TTV)　　【Abstract】　Objective　TheaimofthisstudyistofindouttheprevalenceofTTVinthecryptogenichepatitisandtheclinicalfeaturesofTTVinfected　TTVDNAintheserumwastestedbynestedPCRandtheclinicaldatawas　InfectionrateoftheTTVincryptoge

3、nichepatitis%.Itwasasporadicdisease,andinvolvedmainlytheadults,withnosexualdifference.Thesymptomswerenotable,oftenwithjaundice,buttheleveloftransaminasewereelevatedmoderately.Histologyrevealedtheportalareainflammation.If课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等

4、要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果accompaniedwithotherdisease,theillnesswouldbe　TTVwouldbeaccountedforpartofthereasoninpatientswithcryptogenichepatitis.　　【Keywords】　Viralhepatitis,　　Non-A～Ehepatitis　　Virus　　已知的5种肝炎病毒已有特异性检测手段，但

5、目前仍有慢性肝病缺乏甲～戊型肝炎病毒感染标志［1］，一些暴发性肝衰竭也无已知病毒感染标志［2］；庚型肝炎病毒(HGV)部分地解释了非甲～戊型肝炎的病因，但HGV感染更多地发生于HBV或HCV感染患者［3，4］，且对肝脏的致病性尚未完全得到证实，提示尚有甲～戊、庚型肝炎病毒以外的病毒引起急、慢性肝炎。最近，日本学者认为在输血后肝炎患者中发现的输血传播性病毒(TTV)可能是一种新的肝炎病毒［5］；国内骆抗先等［6］也在一次暴发性不明原因肝炎中发现与TTV具有同源性基因片段的病毒。为了解这种新型病毒在不明原因肝炎中的意义及其临床特征，我

6、们对44例缺乏病毒感染标志的肝炎患者血清进行TTVDNA的巢式聚合酶链反应(PCR)检测，并对其中的阳性病例作初步分析。　　1　材料和方法课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果　　研究对象　所有原因不明的急性肝炎病例均为本院1993～1998年5月的住院患者，诊断符合1995年5月北京第五次全国传染病会议修订的病毒性肝炎诊断标

7、准，所有病例均排除5种肝炎病毒(甲～戊)现症感染的可能性(包括血清学和PCR法检查)，同时检测巨细胞病毒、EB病毒抗体及DNA(PCR法)阴性。　　病毒DNA片段检测　采用巢式PCR检测TTV。DNA。DNA提取：血清100μl以蛋白酶K和十二烷基磺酸钠(SDS)裂解病毒，70℃消化1小时，苯酚、氯仿抽提。PCR反应：按文献报道［5］设计巢式引物：外引物RD035′-GCAGCAGCATATGGATATGT-3′，RD　　038′-TGACTGTGCTAAAGCCTCTA-3′；内引物RD051′-CATCACCATGAATGCC

8、AGGC-3′，RD052′-GTACTTCTTGCTGGTGAAAT-3′。常规加模板、dNTP和Taq酶，按下列参数进行35次PCR循环：94℃45秒，54℃45秒，72℃60秒，最后一次循环72℃420秒；取第二轮PCR产物10μl，在2%琼