外源性wnt5a诱导k562细胞分化表型的实验研究

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1、从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果外源性Wnt5a诱导K562细胞分化表型的实验研究作者：袁媛，司维柯，李招权，潘静，赵宸【摘要】本研究探讨外源性Wnt5a诱导K562细胞定向分化的作用。用重组腺病毒AdWnt5a、AdGFP感染CHO细胞，分别制备Wnt5a和GFP对照条件培养液，并处理K562细胞1-7天，用光学显微镜和电子显微镜观察细胞形态变化；采用过氧化物酶、糖原和非特异性酯酶染色、细胞表面分化抗原CD13、CD14、CD68

2、鉴定K562细胞的分化表型；用流式细胞术检测细胞分化周期的变化。结果表明：与对照GFP条件培养液相比，Wnt5a条件培养液处理的K562细胞形态和超微结构均出现了分化成熟的特征；POX、PAS、αNAE细胞化学染色均为阳性，并且αNAE阳性70％可被氟化钠抑制；单核细胞系表面标志抗原CD14、CD68和粒细胞系表面标志抗原CD13经免疫细胞化学染色均呈阳性，但CD13与对照比较无显著性差异；Wnt5a处理K562细胞5天，细胞周期阻滞在G2期。结论：外源性的Wnt5a可诱导K562细胞向成熟方向分化，并且有向单核细胞系分化的现象

3、。【关键词】诱导分化DifferentiationPhenotypesofK56CellsInducedbyExogenousWnt5a课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果AbstractThisstudywasaimedtoinvestigatetheeffectofexogenousWnt5aondirectionaldi

4、fferentiationofK56cells.Wnt5aandGFPconditionmediumswerepreparedbyrecombinantadenoviralvectorAdWnt5aandAdGFPtransfectingCHOcells.K56cellsweretreatedwithWnt5aandtheGFPconditionmediumsfor1-daysasWnt5atreatedgroupandcontrolgrouprespectively.ThemorphologicalchangesofK56cell

5、swereobservedbylightmicroscopeandelectronmicroscope;thedifferentiationphenotypesofK56cellswereidentifiedbythecytochemicalstainingofPOX，PAS，αNAEandimmunocytochemistryofCD13,CD14,CD68,andtheeffectofWnt5aoncellcycledistributionofK56cellswasdetectedbyflowcytometry.Theresu

6、ltsshowedthatthemorphologyandultrastructureofK56cellstreatedbyWnt5adisplayeddifferentiationmaturefeature;bothPOXandPASstainingshowedhigherpositiveratioinWnt5atreatedgroupthanthatincontrolgroup;theαNAEstainingalsowaspositive，butpositiveintensityinWnt5atreatedgroupcould

7、beinhibitedupto0％byNaF.TheexpressionsofmonocyticdifferentiationantigensofCD14,CD68inWnt5atreated课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果groupwerehigherthanthoseincontrolgroup，buttheexpre

8、ssiondifferencesofgranulocyticdifferentiationantigenCD1betweenWnt5atreatedgroupandcontrolgroupwerenotsignificant.Thec