壳聚糖对黄芩水提液净化除杂工艺的研究

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1、从本学科出发,应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性,便于研究生提出新见解,特别是博士生必须有创新性的成果壳聚糖对黄芩水提液净化除杂工艺的研究作者:万焱,王启帅,杜绍亮,杨云【摘要】目的筛选壳聚糖对黄芩水提液的最佳纯化工艺,从而优化黄芩苷的提取工艺。方法以黄芩苷得重为衡量指标,运用正交实验考察不同影响因素对絮凝效果的影响,同时采用HPLC测定其含量对工艺进行系统评价。结果壳聚糖对黄芩水提液絮凝的最佳工艺条件:体系pH5,搅拌时间10min,体系温度40℃,絮凝剂浓度%。结论壳

2、聚糖对黄芩水提液具有较强的絮凝作用,该方法简单可行,可提高黄芩药材的利用率。【关键词】壳聚糖;黄芩苷;水提液;絮凝剂黄芩ScutcnanaBaicalensisGeorgi为唇形科植物黄芩的干燥根[1],主要功效为清热燥湿、泻火解毒、止血安胎。黄芩中主要成分为黄酮类化合物,其中含量较高的有效成分有黄芩苷(Baicalin)、汉黄芩苷(Wogonoside)、黄芩素(BaicalEin)、汉黄芩素(Wogonin)等。目前代谢研究表明,黄芩苷和汉黄芩苷为前药,黄芩素和汉黄芩素为二者的真正药效物质基础。药理

3、学课题份量和难易程度要恰当,博士生能在二年内作出结果,硕士生能在一年内作出结果,特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发,应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性,便于研究生提出新见解,特别是博士生必须有创新性的成果研究表明,黄芩具有多种药理作用,如抗菌、抗病毒、抗炎、抗变态反应、抗氧化、清除氧自由基、抗癌、抗肿瘤、抗凝、抗血栓形成和保护肝脏、心脑血管、神经元等作用,目前临床主要用于抗炎和抗菌。在现代中药生产中,经常使用酸沉法从中药黄芩中提取粗品黄芩苷来代替黄芩。但在黄芩

4、水提液的酸沉过程中,水提液中的一些有机大分子杂质如淀粉、果胶、蛋白质等会随有效成分一起沉降下来,这就造成粗品黄芩苷中含有许多无效成分,降低了疗效。如果用传统的纯化工艺,黄芩苷的得率又得不到保证,进而造成了原药材的大量浪费。壳聚糖作为长链高分子碱性多糖,在稀酸中可形成活性基团-NH3+,对溶液中带负电荷的成分如蛋白质、树胶、鞣质、单宁、部分多糖等[2]进行吸附,从而达到对黄芩水提液净化除杂的作用,在保证产量的前提下实现提高黄芩苷含量的目的。 1仪器与试剂仪器  LC-20AT型HPLC;88-1型定时恒温

5、磁力搅拌器;中速自动平衡微型离心机;ZK-82型真空干燥箱;德国SartoriusBS224S电子天平;METTLERAE240电子分析天平及实验过程所需的玻璃仪器。试剂壳聚糖;甲醇;双重蒸馏水;其他试剂均为分析纯。方法.1壳聚糖絮凝剂的配制用1%的乙酸为溶剂,分别配制浓度为%,%,%的壳聚糖溶液,充分溶胀后作为絮凝剂,备用。.2黄芩水提液的制备课题份量和难易程度要恰当,博士生能在二年内作出结果,硕士生能在一年内作出结果,特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发,应着重选对国民经济具有一定实用价值

6、和理论意义的课题。课题具有先进性,便于研究生提出新见解,特别是博士生必须有创新性的成果筛选合格的黄芩干燥根,蒸透后切片。称取黄芩饮片100g,分别加10倍,8倍量水煎煮2次,1h/次,纱布过滤,合并两次滤液,平分4份,待用。.3黄芩苷粗品的制备[3]黄芩水提液→加入壳聚糖→静置过夜→离心→上清液水浴加热至40℃→盐酸调→40℃恒温1h→静置过夜→倾去上清液→沉淀水洗至pH→减压抽滤→60℃真空干燥→即得。.4单因素实验分别以体系温度、体系pH、搅拌时间、壳聚糖用量以及壳聚糖的浓度为考察因素,在不同水平下

7、进行单因素实验,以期筛选出影响絮凝效果的主要因素和水平。从而为正交实验设计提供依据。.5黄芩苷含量测定方法学考察.色谱条件色谱柱:HypersilODSC18;检测器:SPD-20A(SHIMADZU);工作站:CS-Light;流动相:甲醇-%磷酸水溶液(4∶53);柱温:35℃;流速:1ml/min;检测波长:27nm。.对照品溶液的制备取黄芩苷,精密称定,置10ml量瓶中,加少量甲醇溶解并定容至刻度,摇匀,μm微孔滤膜过滤,备用。.供试品的制备称取黄芩苷样品适量,精密称定,置于ml量瓶内,加少量甲

8、醇溶解并定容至刻度,摇匀,μm微孔滤膜过滤,备用。.课题份量和难易程度要恰当,博士生能在二年内作出结果,硕士生能在一年内作出结果,特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发,应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性,便于研究生提出新见解,特别是博士生必须有创新性的成果标准曲线的绘制分别取黄芩苷标准品溶液2,4,6,8,10,1μl,以进样量为横坐标,峰面积为纵坐标,得到黄芩苷回归方程:Y=+,R=,说明黄芩苷在

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