壳聚糖絮凝法精制红花水提液工艺的研究论文

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1、壳聚糖絮凝法精制红花水提液工艺的研究论文陈英，李永吉，程淑云，徐缓【摘要】目的优选壳聚糖精制红花水提液的工艺。方法采用L9（34）正交设计表，以羟基红花黄色素A得率为指标，应用高效液相色谱法测定含量，对壳聚糖精制红花工艺进行优化。结果最佳工艺为A3B2C1，即将药液浓缩至生药∶药液＝1∶6.freell/g生药，放置时间6h。结论壳聚糖絮凝法澄清效果好，经济实用，可用于红花水提液的精制。【关键词】壳聚糖；红花；高效液相色谱法；正交实验Abstract：ObjectiveTooptimizerefinementofCarthamustinctoriusL.b

2、ychitosanflocculation.MethodsApplyingtheL9（34）oforthogonaldesignandhighperformanceliquidchromatography(HPLC),izedconditionedicinalherb:physicliquor=1:6,theadditionofchitosanl/gmedicinalherb,setting6hours.ConclusionChitosanflocculationmethodicfortheclarificationandcanbeusedintheref

3、inementofCarthamustinctoriusL.KeyustinctoriusL.;HPLC;Orthogonaldesign脑得生由三七、红花、葛根、川芎、山楂5味中药材组成，其中红花为菊科植物红花CarthamustinctoriusL．的干燥花，现代药理研究表明，它对心血管系统有广泛而显著的作用，其中查耳酮苷类化合物——羟基红花黄色素A为其活血化淤作用的主要有效成分。采用传统精制工艺，需要消耗大量乙醇，生产成本高，且有效成分易损失，影响制剂的疗效［1］。为了在纯化过程中尽量保留浸出液的有效成分，采用正交设计法，以羟基红花黄色素A得率为指标

4、对红花提取液精制工艺进行了研究，优选出壳聚糖絮凝法的最佳工艺。1仪器与试药1.1仪器高效液相色谱仪（poustinctoriusL．的干燥花。对照品：羟基红花黄色素A（中国药品生物制品检定所，批号：200301）；壳聚糖（上海伟康生物制品有限公司，型号XNJ-1）；甲醇为色谱纯；水为超纯水；其余试剂为分析纯。2方法与结果2.1羟基红花黄色素A含量测定［2］2.1.1色谱条件色谱柱：KromasilC18（4.6mm×200mm,5μm）；流动相：0.7%磷酸-甲醇-乙腈（75∶15∶10）；流速：1.0ml/min；检测波长：403nm；柱温：30℃。2.

5、1.2对照品溶液的制备精密称定60℃减压干燥至恒重的羟基红花黄色素A对照品适量，加水溶解，使成0.078mg/ml的溶液，备用。2.1.3样品溶液的制备精密吸取精制后的供试品溶液1ml，用水定容至25ml容量瓶，待含量测定用。2.1.4标准曲线取对照品溶液（0.078mg/ml），通过系统全自动进样器，分别进样1，2，4，8，16μl,在上述色谱条件下,测得峰面积。以峰面积Y为纵坐标,对照品进样量X(μg)为横坐标,绘制标准曲线。得回归方程:Y=2.82×106X－2.53×104，r＝0.9999(n=5)。线性范围为0.078～1.248μg。2.1.

6、5精密度实验精密吸取上述对照品溶液10μl，连续进样5次，测定峰面积值的RSD为0.2%（n=5）。2.1.6重复性实验精密吸取同一供试品溶液10μl，连续进样5次，测定峰面积值的RSD为0.4%（n=5）。2.1.7稳定性实验取同一供试品溶液10μl，分别于0，2，4，8，12，24h各进样1次，测定峰面积值的RSD为0.4%（n=6）。2.1.8加样回收率实验取已知含量的样品，精密加入对照品溶液，依法制成供试液,按标准曲线法进行测定，计算回收率，结果见表1。表1加样回收率测定结果（略）2.2壳聚糖絮凝法精制工艺2.2.1壳聚糖溶液的制备称取1g壳聚糖，

7、溶于1％醋酸溶液100ml，得到1％壳聚糖醋酸溶液，备用。2.2.2供试品溶液的制备取红花药材200g，加适量水湿润1h，药粉分次装入渗漉筒内，浸渍24h，加至10倍体积水，以一定流速渗漉，收集渗漉液定容于2000ml容量瓶。从2000ml药材提取液中取27份，每份30ml约含3g生药，按正交实验设计表进行试验，50℃恒温水浴放置后，离心（4000r/min），取上清液过滤后，取适量体积分别测定含量及固形物量。2.2.3正交实验结合文献报道，对影响提取效果的主要因素药液浓缩比例、壳聚糖加入量及放置时间进行考察，每个因素选择三个水平进行实验，因素水平见表2。

8、表2因素水平（略）根据因素水平表，选择了L9（34）正交表，以羟基