中国人肌营养不良症患者蛋白基因缺失的研究

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1、从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果中国人肌营养不良症患者蛋白基因缺失的研究关键词：肌营养不良;基因;缺失　　摘要:目的了解中国人Duchenne和Becker型肌营养不良症患者基因缺失情况。方法用覆盖dystrophincD-NA全长%的5个dystrophincDNA探针检测41名无亲缘关系的DMD/BMD患者。结果22名患者存在基因突变，其中DMD患者的检出率为%:BMD患者的检出率为45%。21名患者存在基因缺失，占检

2、出数的%。结论缺失主要分布在cDNA8检测区，其次在cDNA1-2a检测区。　　关键词:肌营养不良;基因;缺失　　StudyonthegenedeletioninpatientswithDuchennemusculardystrophy.课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果　　　Abstract:ObjectiveT

3、oinvestigatethecircumstancesofgenedeletionofChinesepatientswithDuchnne’stypemusculardys-trophy.MethodsCircumstancesofgenedeletionsin41unrelatedDMDandBMDpatientswerestudiedbyusinga32-p-dCTPlabeleddystrophincDNA%ofdystrophinfull-lengthcDND.ResultsGenemutationwasobse

4、rvedin22patientsaccounted%，theDMDdetectionrate%andBMDdetectionrate%.Genedeletionwasoccurredto21patientsaccounted%ofthetotalde-tected.ConclusionThehotpointofgenedeletioninDMDpatientswasmainlydistributedinthedeletionwasnotevenlydistributedinvolvingdifferentexonsande

5、xtent.　　Keywords:Musculardystrophy;Gene;Deletion　　Duchenne和Becker型肌营养不良症是我国最常见的与X染色体连锁的隐性遗传性疾病，发病率约1/3300活男婴［1］。该病系肌营养不良蛋白基因突变所致［2，8］。DMD患者在2～3岁出现肌无力，渐发展成不能行走，12岁开始依赖轮椅，20岁左右常因呼吸衰竭死亡;BMD患者临床症状较缓和，大多在15岁以后的某个时期依赖轮椅，但有的直到60岁仍能行走［1］。　　1对象和方法　　研究课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作

6、出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果对象41名无亲缘关系的DMD/BMD患儿标本随机收集自解放军总医院肌病门诊。其中DMD患者30名，年龄在2～23岁;BMD患者11名，年龄在12～38岁。根据进行性肌萎缩、肌无力，腓肠肌假性肥大，家族史，血清CK值显著增高，肌电图呈肌源性损害，肌活检示肌肉坏死、变性、再生、结缔组织增生等特征确诊患者。取5名正常女性标本作为对

7、照。　　方法实验所用dystrophincDNA探针菌种购自美国ATCC公司。采用碱变性法抽提质粒DNA［3］，用限制性内切酶EcoRI和/或HindⅢ酶切质粒，电泳分别回收5个探针片段:cDNA1-2a，cDNA4-5a，cDNA5b-7，cDNA8和cDNA9。随机引物法将α-32p-dCTP标记于cDNA探针上［4］。按Smith方法制备白细胞DNA［5］，用HindⅢ完全酶解后于%的琼脂糖凝胶中电泳36～48h，再经Southern印迹将DNA转移至尼龙膜上，固定后置于预杂交液中，65℃预杂交3h，加入变性后的探针

8、继续于65℃杂交12h［6］。-70℃放射自显影3～7d，冲片后分析结果。　　2结果课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别