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时间:2018-12-30
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1、为了适应公司新战略的发展,保障停车场安保新项目的正常、顺利开展,特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划酵母菌的制片与观察实验报告 微生物实验报告酵母菌的培养及观察实验 刘欣怡XX 生物科学基地班组别:周一下午三组同组者:曹平平,周楠, 刘艺,刘希伟 实验完成时间:XX年11月19号 一、实验目的 1、了解酵母菌的形态及出芽方式 2、学习区分酵母菌的死细胞和活细胞 3、掌握酵母菌子囊孢子的观察方法 4、巩固显微镜操作技术和无菌操作技术 二、实验器材 1.菌种: 酿酒酵母7d麦氏培琼脂斜面培养物,酿酒酵母2dYPD液体培养物。 2.培养
2、基: 酵母合成培养基,麦氏琼脂斜面 3、试剂: %美蓝水溶液,5%孔雀绿水溶液,%番红水溶液,95%乙醇,蒸馏水、香柏油、去离子水等。目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解,并感受到安保行业的发展的巨大潜力,可提升其的专业水平,并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展,保障停车场安保新项目的正常、顺利开展,特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划 4.仪器 试管,锥形瓶,酒精灯,显微镜,擦镜纸,酒精灯,载玻片,盖玻片,双层瓶,接种环,滴管,滤纸,镊子、培养皿等。 三、实验原理 1、培养基: 酵母菌的能源主要是糖,一般用麦芽汁琼脂培
3、养基培养。但实验要求不是很严格时,可以用由酵母膏、蛋白胨、葡萄糖配置的培养基来培养;但酵母菌子囊孢子的观察要用麦氏培养基,其有利于子囊孢子的形成。 2、酵母菌: 酵母菌是多形的、不运动的单细胞真核微生物,细胞核与细胞质已有明显的分化,菌体比细菌大。繁殖方式也较复杂,无性繁殖主要是出芽生殖,仅裂殖酵母属是以分裂方式繁殖;有性繁殖是通过接合产生子囊孢子。本实验通过用美蓝染色浸片来观察生活的酵母形态和出芽生殖方式。 3、酵母菌的形态、大小、结构: 酵母菌是单细胞真菌,并非系统演化分类的单元; 酵母菌细胞的形态通常为圆形、卵圆形或椭圆形。也有特殊形态,如柠檬形、三角形
4、、藕节状、腊肠形,假菌丝等; 比细菌的单细胞个体要大得多,一般为1-5微米×5-20微米;目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解,并感受到安保行业的发展的巨大潜力,可提升其的专业水平,并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展,保障停车场安保新项目的正常、顺利开展,特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划 酵母菌无鞭毛,不能游动; 酵母菌具有典型的真核细胞结构,有细胞壁、细胞膜、细胞核、细胞质、液泡、线粒体等,有的还具有微体。 4、美蓝染色液: 美蓝为无毒性染料,其氧化型为蓝色,而还原型为无色。用它对酵母菌染色时,由于活细胞的新陈代谢作用
5、,使细胞内具有较强的还原能力,能使美蓝从蓝色的氧化型变为无色的还原型,所以酵母的活细胞无色;对于死细胞或代谢缓慢的老细胞,则因它们无此还原能力或还原能力极弱,而被美蓝染成蓝色或淡蓝色。因此,用美蓝水浸片不仅可观察酵母的形态,还可以区分死、活细胞。 5、水-碘液染色液: 该染液将革兰氏染液用碘液用水稀释4倍后得到的,亦可用于酵母形态和出芽生殖的观察。 6、子囊孢子的观察:目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解,并感受到安保行业的发展的巨大潜力,可提升其的专业水平,并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展,保障停车场安保新项目的正常、顺利开展,特制定安
6、保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划 酵母菌形成子囊孢子需要一定的条件。麦氏培养基有利于酿酒酵母子囊孢子的形成,能否形成子囊孢子及其形态是酵母菌分类鉴定的重要依据之一。孢子染色原理:孢子壁厚不易着色,但是一旦着色就很难被脱色。因此先用强染色剂下染色,使染料进入菌体和孢子,水洗时菌体中染色被洗脱而孢子中染料保留。在用对比度大的复染色剂染色后,菌体染上复染色剂的颜色而孢子保留原来颜色,这样可将两者区别开来。 酵母菌子囊孢子的形成过程为: 两营养细胞各伸出一个小突起而相接触,使两个细胞结合起来,而后接触处的细胞溶解,经质配和核配后,形成双倍体核,原来的细胞形成合子。
7、此双倍体细胞可以进行芽殖。在适宜条件下,合子减数分裂,双倍体核分裂成4-8个单倍体核,核外再围以原生质逐渐形成子囊孢子,子囊孢子包含在由母细胞壁演变而来的子囊(即原来的二倍体细胞)中。子囊孢子的形成与否及其数量和形状,是鉴定酵母菌的依据之一。 将酿酒酵母从营养丰富的培养基上移植到含有醋酸钠和葡萄糖(或棉籽糖)的产孢培养基上,于适温下培养,即可诱导其子囊孢子的形成。本实验即以酿酒酵母为材料观察酵母菌的子囊孢子。 7、酵母菌是少数能在缺氧环境里生存较长时间的一种微生物,它属于兼性菌类。在一般情况下进行有氧呼吸。如环境中有丰富的糖类,它进行
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