植物染色体制片与观察实验报告

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1、植物染色体制片与观察实验报告（洋葱组）姓名：蔡梦雅1230170010同组成员：曹鉴云陈锦容刘艳马彦霞一、屮文摘要：染色体（Chromosome），是细胞N具有遗传性质的物体，易被碱性染料染成深色，又叫染色质。其本质是脱氧核甘酸，是细胞核内由核蛋白组成、能用碱性染料染色、有结构的线状体，是遗传物质基因的载体。这里我们用洋葱染色体作为代表使用压片法制片并且进行观察。二、关键词：染色体洋葱压片法三、引言：洋葱（onion）是百合科（Liliaceae）葱属屮以肉质鱗片和鱗芽构成鳞芽的2年生草本植物，其学名为Allium

2、cepaL，染色体数为2n=2x=16。由表1和图1可见，洋葱的8对染色体中，有7对（第1〜7对）染色体，臂比在1-01-1.70之间，为中部着丝点染色体，1对（第8对），臂比为4.74,为近端部着丝点II带随体的染色体;依据STEB-BINS[4]的核型分类标准，洋葱的染色体核型在遗传进化上属较古老的2A型。100多年来有关染色体与染色体组结构功能的研宄一直是生命科学最活跃的研宄领域之一，现今人们完成基因组测序后回到对染色体上进行基因定位和作图，因此有关染色体的研宄在基因组合功能基因组时代都有重要意义，陈瑞阳教授

3、历时25年的研究完成的《中国主要植物染色体研究》对我国2834种植物染色体数0进行了报道，完成了1045种植物的核型分析，积累了宝贵的染色体棊础数据创建了我国植物染色体研宂信息平台。研宂染色体进化与生物进化的有不可分割的关系，国际对染色体的化学成分，DNA含量，碱基组成和以染色体数目、形态、结构、大小等为特征的核型进化与物种形成和演化关系的研究，为揭示生物进化趋势提供染色体方面的科学资料，总的来说对染色体的研究在各类学科领域内都冇着重要的意义。国内外对洋葱的研究主要在其成分和药用方面，在细胞遗传上张自力和陈瑞阳等对

4、洋葱的C带显示法进行过研宄，田秋元等对洋葱的核型分析及有关制片方法进行了探讨。植物根尖的分生细胞的有丝分裂，每天都有分裂高峰时间，此时把根尖固定，经过染色和压片,再置放在显微镜下观察，可以看到大量处于有丝分裂各时期的细胞核染色体。我们设计了不同的实验方案探究如何制作优良的植物染色体玻片，掌握染色体技术。四、材料与方法：1.取材洋葱（A川umcepa）的鱗茎2.实验器具和药品2.1器具a.载玻片b.盖玻片c.烧杯d.量筒e.培养皿f.滤纸g.玻璃棒h.镊子i.手术刀2.2药品a.0.1mol/L醋酸钠溶液b.0.25

5、%秋水仙素c.冰醋酸d.无水乙醇e.1mol/LHclf.纤维素酶g.果胶酶h.卡宝品红2.3试剂配制卡诺固定液：用3份无水酒精，加入1份冰醋酸（现配现用）。酸解液：一份无水乙醇与一份1mol/L盐酸1:1进行配制。酶解液：用0.4g的纤维素酶和0.15g的果胶酶溶解在20ml蒸馏水里。配制成20ml酶解液。1.实验步骤3.1取材于11月13日中午，将洋葱的鳞茎，置于盛水的小塑料杯上培养。注意选取的洋葱要充实而饱满，表面要油光发亮，底部鳞片薄的老洋葱，去掉老根但不要伤害根芽，用刀片适当削去根部的木栓组织，置于清水中

6、培养，最好使用宿舍放温了的开水，（水的高度要求与洋葱底部正好接触）并且需要注意勤换水，防止根腐烂。3.2预处理将洋葱根尖浸泡到0.25%的秋水仙素溶液屮2小时。3.3固定将预处理过的根部切下，浸泡在配好的卡诺固定液中2.5小时。3.4解离1）酸解：从固定液中取出洋葱根尖，用蒸馏水漂洗，再放到解离液,在60°C水浴中解离。（时间为6—10min）2）酶解：从固定液中取出洋葱根尖，放在0.1mol/L醋酸钠中漂洗。然后放入配好的溶液中，在28°C温箱中解离1小时。3.5压片取出根尖，酸解后的根尖用蒸馏水漂洗，酶解后的根

7、尖用0.1mol/L醋酸钠漂洗，将根尖滴加卡宝品红染液，等待5〜15分钟。盖上盖玻片，用吸水纸吸去多余染液。用镊尖轻轻敲打盖玻片，使细胞铺成薄薄一层。然后用显微镜观察。五、实验结果方案1:酸解:10min分析：解离时间较短，使解离不完全，细胞不能很好的分散开来。并且细胞壁未被破坏，导致染色液无法进入细胞，染色体无法被染色。解决方案：延长酸解吋间。方案2:酸解、酶：10min分析：细胞分裂全处于间期。1:根尖细胞处于间期，而间期细胞没有纺锤丝和纺锤体，不能使细胞停留在中期。2.洋葱根尖秋水仙素处理，卡若固定吋间太短或

8、浓度太小，在两个小时内不能达到预期的结果。3.剪下洋葱根尖的最好时间是正午时分，因为此时洋葱根尖分生区有丝分裂最为活跃，此时固定，可以观察到最多的分裂相，而我们组因为实验材料培养问题，所以固定的时间是10:40,且只固定丫2h,如果固定液浓度不够，就会影响后面的实验结果。实验方案结果展示如下:固定2.5h酸解6min染色10min+/—/++/—/++8mi