实验一植物分生区细胞染色体制片与有丝分裂过程的观察 - 植物生产

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1、目录实验室工作规程1实验一植物分生区细胞染色体制片与有丝分裂过程的观察4实验二核型分析10实验三植物同源多倍体的人工诱发与鉴定12实验四植物性状遗传率估算17实验五性状杂种优势与显性程度估算19实验六控制性状最少基因数目估算21实验七 过氧化物酶同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳23附录32附录Ⅰ常用试剂的配制32附录Ⅱ常用染色液的配制35附录Ⅲ常用缓冲液的配制38附录ⅣX2值表3939实验室工作规程为保证遗传学实验能正常进行并获得理想的实验结果，避免在实验中发生差错和意外事故，实验操作者必须严格遵守实验室规则，认真做好实验前后和实验过程中的各项工作。一、基本规则1．实验前必须预习，明确本次实

2、验的目的、原理、内容和方法。实验时须保持安静，按实验教材和指导教师的要求进行操作，并详实记录实验中出现的情况和获得的实验结果，对资料进行整理分析，得出结论，写出实验报告。2．实验室、工作台、各种仪器、用具、玻璃器皿等必须保持清洁整齐，工作台要严防酸、碱腐蚀。各种化学药品、试剂等必须贴上标签，分门别类，放置一定位置，便于取用。3．正确使用显微镜及各种仪器，切勿使染料或试剂沾污镜头、镜台和所用仪器。如有沾污，须立即用镜头纸擦拭干净。4．取用药品时，所用各类量具必须分开，严禁混用，用后须立即冲洗干净。称量固体药品时，必须在秤盘上铺垫清洁白纸或蜡光纸，调试平衡后再称，以防药品腐蚀秤具。称量纸

3、要做到一称一换，以防药品混杂，导致所配试剂不纯。5．遵守化学实验的操作要求，注意药品配制和使用时的安全。6．实验完毕，须做好清洁整理工作，所用仪器、物品应放还原处。实验过程中如有损坏或丢失仪器用具，应如实填写报告单，视情况进行相应处理。7．全班实验结束后，值日生安排整个实验室的全面清理打扫。离开实验室前，必须关闭所用仪器和灯具的电源，关紧水龙头和门窗。二、显微镜的清洁和保养显微镜是遗传学实验的重要仪器，使用时必须防尘、防高温、防湿、防药品侵蚀，在清洁保养中要做到以下几点：1．取镜时必须一手提镜臂，一手托镜底，防止显微镜滑落损坏。2．取出显微镜后，先用软毛刷、纱布拂擦镜身的防尘污物，用

4、洗耳球吹去缝隙及镜头上的灰尘和纤维等物，再用镜头纸擦拭物镜和目镜，最后用细白丝绸把镜头再擦一次。3．镜检时物镜只能由低倍镜到高倍镜，在高倍镜下只能用微调螺旋调焦，细心操作，以防压碎玻片，损坏镜头。394．若发现镜头被药物或脏物污染，立即用擦镜纸醮少许二甲苯（以刚湿润纸为度）擦掉污物，再用擦镜纸擦干。5．用完显微镜后进行清洁整理，将载物台放至最低处，转动物镜使之不要对着聚光镜，将显微镜放回原处。6．严禁将显微镜与化学药品混藏。三、玻璃器皿的清洁实验室所用玻璃器皿的清洁与否直接影响实验结果，实验前必须对玻璃器皿彻底清洗。（一）初用玻璃器皿的清洗1．新购置的玻璃器皿表面常附有游离的碱性物质

5、，可先用肥皂水或去污粉洗刷，再用清水冲洗干净，然后用1％～2％的盐酸浸泡4h以上，再用清水冲洗后用蒸馏水冲洗2～3次，100℃～130℃烘干备用。2．新载玻片和盖玻片分别在盐酸乙醇[70％～95％工业乙醇（C2H5OH）100ml加浓盐酸（HCl）2ml]中浸泡4h，流水冲净，蒸馏水荡涤、晾干，置95％乙醇中加盖，以便随时取用。（二）使用过的玻璃器皿的清洗1．使用过的器皿应在未干前洗涤，如不能及时清洗，应浸在凉水中。洗涤方法：放入洗衣粉水中煮沸半小时，刷洗，清水冲净，蒸馏水荡涤，晾干或烘干；或在洗涤液中浸泡半小时，清水冲洗，蒸馏水荡涤，晾干或烘干。2．对移液管、滴定管、量筒、量器等，

6、使用后应立即浸泡于凉水中，避免残留的溶液干涸，难以清洗。工作完毕后用流水冲洗，除去附着的试剂、蛋白质等物质，晾干后浸泡在铬酸洗液中4～6h或过夜，再用清水充分冲洗，最后用蒸馏水冲洗2～4次，风干后备用。注：铬酸洗液配制方法重铬酸钾（K2Cr2O7）20g，浓硫酸（H2SO4，工业用，比重1.84）或废硫酸100ml，清水100ml。先将重铬酸钾溶于温水，冷却后徐徐加入浓硫酸，避免发热。此液呈红色，加盖防氧化变质，反复使用至变蓝黑色为止。器皿玻片洗净后再用此液浸泡，可延长其使用时间。3．陈旧或用过的永久制片的玻片，可先在肥皂水中煮沸5～10min，或将玻片微热后浸入二甲苯中脱胶，洗去残

7、留的树胶和浆糊，并用清水冲洗干净。然后放入洗液中浸泡30min，再用清水冲洗掉残留的洗液，最后用蒸馏水洗净，置95％乙醇中保存备用。四、玻璃器皿的干燥和灭菌遗传学实验中以微生物为实验材料时，实验所用的玻璃器皿必须干燥和高温灭菌，防止杂菌污染。39（一）干燥干燥的方法有自然晾干和烘干两种。自然晾干所需时间长，但器皿上无水渍。烘干是将器皿及其它用具置60℃～80℃烘箱中干燥，但器皿上可能留有水渍，因此，在干燥之前应尽可能除去器皿上的水滴。（二）灭菌因高温能使微