水浸片,材料

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1、为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划水浸片,材料　　实验目的：学习细菌的鞭毛染色法　　实验原理：细菌的鞭毛极细，直径一般为10—20nm，只有用电子显微镜才能观察到。但是，如采用特殊的染色法，则在普通光学显微镜下也能看到它。鞭毛染色方法很多，但其基本原理相同，即在染色前先用媒染剂处理，让它沉积在鞭毛上，使鞭毛直径加粗，然后再进行染色。常用的媒染剂由丹宁酸和氯化高铁或钾明矾等配制而成。现推荐以下两种染色法。　　实验器材　　1.活材料：培养12-16h的水稻黄单胞菌

2、，粘质赛氏杆菌或假单细胞菌斜面菌种。　　2.染色液和试剂：硝酸银染色液、8）、Leifson染色液、9）、香柏油、二甲苯。　　3.器材：载玻片、擦镜纸、吸水纸、记号笔、玻片搁架、镊子、接种环，显微镜。　　实验方法　　1.镀银法染色目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　清洗玻片选择光滑无裂痕的玻片，最好选用新的。为了避免玻片相互重叠，应将

3、玻片插在专用金属架上，然后将玻片置洗衣粉过滤液中，煮沸20min。取出稍冷后用自来水冲洗、晾干，再放入浓洗液中浸泡5—6天，使用前取出玻片，用自来水冲去残酸，再用蒸馏水洗。将水沥干后，放入95%乙醇中脱水。　　菌液的制备及制片：菌龄较老的细菌容易失落鞭毛，所以在染色前应将待染细菌在新配制的牛肉膏蛋白胨培养基斜面上连续移接3-5代，以增强细菌的运动力。最后一代菌种放恒温箱中培养12—16h。然后，用接种环挑取斜面与冷凝水交接处的菌液数环，移至盛有1—2mL无菌水的试管中，使菌液呈轻度混浊。将该试管放在37℃恒温箱中静置10min，让幼龄菌

4、的鞭毛松展开。然后，吸取少量菌液滴在洁净玻片的一端，立即将玻片倾斜，使菌液缓慢地流向另一端，用吸水纸吸去多余的菌液。涂片放空气中自然干燥。　　用于鞭毛染色的菌体也可用半固体培养基培养。方法是将%的琼脂肉膏培养基熔化后倒入无菌平皿中，待凝固后在平板中央点接活化了3-4代的细菌，恒温培养12-16h后，取扩散菌落的边缘制作涂片。　　染色　　①滴加A液，染4—6min。　　②用蒸馏水充分洗净A液。　　③用B液冲去残水，再加B液于玻片上，在酒精灯火焰上加热至冒气，约维持—1min。　　④用蒸馏水洗，自然干燥。目的-通过该培训员工可对保安行业有初

5、步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　镜检：先低倍，再高倍，最后用油镜检查。　　结果：菌体呈深褐色，鞭毛呈浅褐色。　　2.改良Leifson染色法　　清洗玻片法同1。　　配制染料见附录二9。染料配好后要过滤15-20次后染色效果才好。　　菌液的制备及涂片　　①菌液的制备同1。　　②用记号笔在洁净的玻片上划分3—4个相等的区域。　　③放1滴菌液于第一个小区的一端，将玻片倾斜

6、，让菌液流向另一端，并用滤纸吸去多余的菌液。　　④干燥在空气中自然干燥。　　染色　　①加染色液于第一区，使染料覆盖涂片。隔数分钟后再将染料加入第二区，依此类推，其目的是确定最合适的染色时间，而且节约材料。　　②水洗：在没有倾去染料的情况下，就用蒸馏水轻轻地冲去染料，否则会增加背景的沉淀。③干燥：自然干燥。　　镜检先低倍观察，再高倍观察，最后再用油镜观察，观察时要多找一些视野，不要企图在1-2个视野中就能看到细菌的鞭毛。　　结果：菌体和鞭毛均染成红色。目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的

7、专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　实验作业：给出鞭毛菌的形态图　　注意事项　　1.镀银法染色比较容易掌握，但染色液必须每次现配现用，不能存放，比较麻烦。　　染色法受菌种、菌龄和室温等因素的影响，且染色液须经15-20次过滤，要掌握好染色条件必须经过一些摸索。　　3.细菌鞭毛极细，很易脱落，在整个操作过程中，必须仔细小心，以防鞭毛脱落。　　4.染色用玻片干净无油污是鞭毛染色成功的先决条件。　　附：细菌的运动性观察　　实验

8、原理细菌是否具有鞭毛是细菌分类鉴定的重要特征之一。采用鞭毛染色法虽能观察到鞭毛的形态、着生位置和数目，但此法既费时又麻烦。如果仅须了解某菌是否有鞭毛，可采用悬滴法或水封片法直接在光学显微镜下检查活细菌是否具