受体,实验计划

《受体,实验计划》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划受体,实验计划　　实验步骤：　　细胞培养：　　1、间充质细胞培养：细胞　　2、U251和SHG44胶质瘤细胞系:细胞进行常规培养，培养基选用DMEM-高糖＋10%FBS，用胰酶＋EDTA消化细胞，吹打传代，取第1-6代细胞做靶细胞，剩余细胞冻存待用。　　利用流式分选,建立表达凋亡受体阳性与阴性的胶质瘤癌细胞系:☆☆细胞表面直接免疫荧光染色操作步骤1、将单细胞悬液加入2ml圆底离心管中，离心，1500rpm，5min，弃上清液。2、以冷PBA1ml，离心洗涤，弃上清液。3、

2、加入用PBA稀释的荧光素标记的抗体200ul。用微量移液器轻轻吹打混匀，4℃或置冰上孵育30min-1h。4、离心弃上清液。5、加入冷PBS1ml,离心洗涤2次，以除去未结合的多余抗体成分。6、向细胞中加入冷PBS500ul,吹打混匀，置流式管中，4℃避光保存，待测。　　质粒制备：TRAIL-GFP属于绿色荧光蛋白的分泌型TRAIL非病毒表达质粒，PTEN-GFP非病毒表达质粒。感受态、质粒均购得。　　1、质粒转化：　　2、质粒提取：质粒提取盒目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新

3、战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　3、质粒转染转染通过TransIT-2020进行。转染前24h，在6孔板上　　5每孔放置2mlOPTI-MEM，加入×10MSCs细胞，转染时达到80-90%铺板，在转染当天制作转染试剂混合物，分别制作TRAIL、PTEN、空白质粒对照三种混合物，各两组制作完成后立即加入到6孔板中，常规培养4-6h换液，加入含血清常规培养基。培养24h后，可以用胰酶＋EDTA收获实验组＋实验对照组。培养48h后收获检测表达组。：　　体外靶向杀伤体系构建　　1、靶向杀伤体系：在TRANSWELL培养

4、小室上层放置MSCTRAIL-PTEN系列细胞，滤膜孔径μm，小室底层为不同类型胶质瘤细胞。　　2、间接杀伤体系：在TRANSWELL培养小室上层放置MSCTRAIL-PTEN系列细胞，滤膜孔径μm，小室底层为不同类型胶质瘤细胞。　　TRAILPTENTRAILPTEN，4.实验分组：a、靶向杀伤组，在Transwell小室上层放置MSC,MSC，MSC+MSC，　　滤膜孔径8μm，下层放置U251(a1)，SHG44，SHG44,　　TRAILPTEN细胞，混合培养作为直接培养组。B、间接杀伤组，在Transwell小室上层放置MSC,MSC，TRAILPTEN，MSC+MSC，

5、滤膜孔径μm，下层放置胶质瘤系列细胞混合培养作为间接培养组。C、目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　RFP实验对照组，单纯MSC与胶质瘤系列细胞混合培养。D、空白对照组，培养基与肿瘤细胞　　混合培养。各组与肿瘤细胞比例接近1:1.　　荧光显微镜观察细胞凋亡，细胞存活率检测使用live/deadViability/CytotoxicityAssayKit(Invitrogen)，分

6、组培养如上，在第2天，对靶向杀伤组，第3天对间接杀伤组分别换液，在黑暗环境下室温孵育10MIN，然后经显微镜摄片成像。　　统计分析。　　问题：1、是否对癌细胞进行标记　　2、　　实验记录　　实验研究进展　　法桐冬季实验规划草稿　　一、实验目的　　1.相对含水量的测定　　选定美、英、法、速生，四种悬铃木，每种选定三棵，对每种树每一棵树每个月进行测定枝条的含水量，观察枝条含水量在不同月份的变化。对每一棵树枝条的含水量在每个月份进行动态测定。　　2.根的活力测定目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为

7、了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　选定美、英、法、速生，四种悬铃木，每种选定三棵，对每种树每一棵树每个月进行根的活力测定，观察根的活力在不同月份的变化。对每一棵树根的活力在每个月份进行动态测定。　　3.抗害性测定　　为研究不同种悬铃木抗寒性差异，用电导法研究低温胁迫条件下不同种悬铃木的一年生枝条相对电导率的变化规律，并利用Logistic方程对变化曲线进行拟合，计算其低温半致死温度。　　4